2型糖尿病大鼠模型中對(duì)胰島素升高機(jī)制的初步探討.pdf

1、目的:2型糖尿病以胰島素抵抗及胰島素分泌相對(duì)不足為特征。其中胰島素分泌相對(duì)不足被認(rèn)為是發(fā)病的主要原因。在我們先前的研究中發(fā)現(xiàn)，在2型糖尿病大鼠中，隨著疾病的發(fā)展出現(xiàn)胰島素濃度升高的現(xiàn)象。本實(shí)驗(yàn)中通過(guò)建立一種非常接近2型糖尿病自然病程的動(dòng)物模型，探討2型糖尿病發(fā)展過(guò)程中胰島素升高的機(jī)制，從而為2型糖尿病的治療提供新思路。
　　 方法:高糖高脂飼料喂養(yǎng)后，給予鏈脲佐菌素(STZ)(30mg/kg)一次性腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型

2、(n=70)。所有動(dòng)物飼養(yǎng)于一定溫度及濕度。自由進(jìn)食水，12h光照。1周后空腹血糖持續(xù)≥11.1mmol/L的大鼠作為模型組（4組），其余實(shí)驗(yàn)組包括空白對(duì)照組（1組）、普通飼料+STZ處理組（2組）、高脂飼料組（3組）。各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分別于STZ處理前及處理后72h、4周、8周、12周、16周、18周、24周取血清應(yīng)用ELISA試劑盒行大鼠胰島素定量測(cè)定，后在2％戊巴比妥鈉（30mg/kg）麻醉下取出胰腺組織行免疫組化染色。Brdu（5-

3、溴脫氧尿嘧啶核苷）免疫組化染色觀察細(xì)胞的增殖;胰島素染色標(biāo)記β細(xì)胞。所有數(shù)據(jù)應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)正態(tài)性檢驗(yàn)以明確資料的總體分布類型，正態(tài)分布數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示(mean±SD)，數(shù)據(jù)分析應(yīng)用單因素方差分析，若方差分析有顯著性則進(jìn)一步行均數(shù)間的兩兩比較。非正態(tài)分布數(shù)據(jù)用中位數(shù)（四分位間距）表示[Md(Interquartile Range)]，組間比較采用Wilcoxon秩和檢驗(yàn)。P＜0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

4、義。
　　 結(jié)果:(1)血糖:實(shí)驗(yàn)組中3天(16.7±2.6)與0天(6.8±0.5)相比血糖明顯升高，(P=0.00＜0.05)，此后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)與3天相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，(P＞0.05)。普通飼料+STZ組3天時(shí)血糖(14.4±2.7)明顯升高，與0天相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，(P=0.00＜0.05)，3天后血糖水平開(kāi)始回落，4周后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)血糖水平與0天相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，(P＞0.05)。其他兩組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)相比血糖濃度均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異

5、，(P＞0.05)。(2)血清胰島素檢測(cè)結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組3天時(shí)胰島素濃度(30.393±2.038)開(kāi)始升高，但與0天(28.061±1.963)相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。4周時(shí)(31.321±2.467)升高明顯，與0天、3天相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.01＜0.05)，4周、8周、12周、16周、18周相比胰島素濃度無(wú)顯著性差異，(P＞0.05)。12周時(shí)胰島素濃度達(dá)到最高水平(37.071±5.537)。28周時(shí)胰島素濃度(30.854±3.4

6、20)回落至較低水平，與0天比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，(P＞0.05)。(3)HE染色:模型組胰島組織出現(xiàn)β細(xì)胞由正常逐漸發(fā)展為水腫、β細(xì)胞減少、空泡變性及壞死的病理變化。(4)胰島素陽(yáng)性細(xì)胞:3天及12周的IOD值分別為190.2491±29.923、1113.367±14.684，12周與3天相比，IOD值明顯增大，說(shuō)明胰島素陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)目增多，胰島素濃度增大(P=0.000＜0.05)。兩組的Diameter值分別為11.670±0.65

7、8、14，235±0.968，胰島β細(xì)胞的平均直徑12周比3天明顯增大(P=0.009＜0.05)。(5)Brdu陽(yáng)性細(xì)胞:3天、4周及12周時(shí)胰島中Brdu陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)目分別為3.5±1.048、4.0±0.894、7.2±1.169，3天與4周相比Brdu陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)目無(wú)明顯差異(P＞0.05);12周與3天相比，Brdu陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)目明顯增多(P=0.001＜0.05);12周與4周相比，Brdu陽(yáng)性細(xì)胞的數(shù)目也明顯增多(P=0.