膽固醇在PAMAM介導的基因傳遞過程中的作用.pdf

1、聚酰胺-胺（PAMAM，polyamidoamine）以其獨有的分子結構和物理特性，能夠通過靜電疏水等作用與DNA緊密結合，并將其縮聚，保護DNA不被降解，是近年來廣泛使用的非病毒基因治療載體。但是相比病毒載體，PAMAM的轉染效率仍然很低，這是由于它在轉染過程中存在多個屏障。對于PAMAM/DNA復合物與細胞結合并進入細胞的具體機制的理解，克服PAMAM轉染過程的細胞膜屏障，將有助于我們找到提高PAMAM轉染效率方法。 本文

2、采用卵磷脂脂質體模擬細胞膜骨架，并在其中加入膽固醇單組分，通過等溫微量量熱法，Zeta電勢和透射電子顯微鏡，對PAMAM/DNA復合物與脂質體的相互作用進行考察，探索PAMAM/DNA復合物與脂質體膜的作用機制，以及膽固醇在其中所起到的作用。 熱力學研究表示，對于含有和不含有膽固醇的脂質體，PAMAM/DNA復合物主要通過靜電作用與其表面結合，反應由焓驅動，膽固醇的加入將使結合在表面的PAMAM/DNA復合物能夠嵌入脂雙層中，

3、從而引起焓變、熵變的增大，甚至出現(xiàn)聚集的吸熱過程。PAMAM/DNA復合物的電荷比大于1時，脂質體的負電勢隨著PAMAM/DNA復合物的加入而減小，說明兩者通過靜電作用結合，膽固醇在靜電結合的過程中沒有作用。通過電鏡觀察，對于不加膽固醇的脂質體，PAMAM/DNA復合物結合在脂質體表面，可以看到兩球結合的狀態(tài)，對于加入膽固醇的脂質體，PAMAM/DNA復合物進入脂質體內部，脂質體粒徑增大，仍為球狀。各種檢測均表明.PAMAM/DNA復合