羧甲基殼聚糖止血作用研究及其血液安全性評價.pdf

1、目的:有效的止血是外科手術中需要解決的重要問題,尤其對于多血管的實質性臟器,如肝外傷出血,常伴有大量失血導致的凝血功能障礙等。常用的止血方法如直接壓迫、結扎和電灼止血等很難奏效。目前已研發(fā)出多種止血材料,臨床肝臟外科手術中常用的止血材料包括可吸收明膠海綿、膠原蛋白海綿、氧化纖維素和纖維蛋白膠。它們各自存在不同的缺點和局限性,前三者需要正常的凝血功能作為其發(fā)揮作用的前提,后者雖然可在凝血功能障礙時發(fā)揮止血作用,但由于其準備耗時、易被活動性

2、出血沖走,在肝臟外傷手術中使用受限。因此,更有效的止血材料仍有待開發(fā)。羧甲基殼聚糖是由甲殼素經(jīng)脫乙?；玫降漠a(chǎn)物--殼聚糖,經(jīng)羧甲基化的衍生物,具有良好的水溶性和生物相容性、生物降解性、成膜性、止血、愈創(chuàng)、消炎等作用,在醫(yī)用生物材料的應用方面有廣闊前景。本論文旨在研究羧甲基殼聚糖為基質的止血材料的止血效果、止血機理和愈創(chuàng)效果,以及其經(jīng)機體降解吸收后對血液系統(tǒng)的影響,為該材料的長期、廣泛地應用提供理論依據(jù)。
　　 方法:1.研究羧

3、甲基殼聚糖的理化性質,檢測其水分、灰分、水溶性、重金屬含量、等電點、脫乙酰度、羧化度、粘均分子量、數(shù)均分子量、紅外圖譜和體外降解率。2.以Wistar大鼠為實驗動物,制造肝素化大鼠肝臟敞開型傷口模型。設定實驗組、對照組和空白組,每組實驗前皮下注射低分子量肝素鈉,然后實驗組使用羧甲基殼聚糖用于傷口創(chuàng)面,對照組使用速即紗,空白組不使用任何物質。通過計算出血量和止血率評價材料的止血效果,并探討了材料的止血機理。分別于術后1周、2周和3周,肉眼

4、觀察以及制作肝臟損傷部位的病理組織切片,評價材料促進傷口愈合的情況。3.將羧甲基殼聚糖植入大鼠腹腔(135mg／kg),分別于6h,12h,1d,2d,3d,4d,7d,10d及14d采集血樣,檢測凝血酶時間(TT)、凝血酶原時間(PT)、部分凝血活酶時間(APTT)、纖維蛋白原(FIB)以及血小板第四因子(PF4)評價材料對大鼠凝血功能的影響,檢測抗凝血酶-Ⅲ(ATⅢ)評價材料對大鼠抗凝功能的影響,檢測纖維蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)、D

5、二聚體(DO)以及纖溶酶原(PLG)評價材料對大鼠纖溶功能的影響,檢測全血粘度低切(BVL)、中切(BVM)、高切(BVH),以及血漿粘度(PV)評價材料對大鼠血液流變的影響。
　　 結果:1.實驗所用的羧甲基殼聚糖水溶性較好,重金屬含量小于10,符合可吸收植入型醫(yī)用生物材料要求。2.在大鼠肝臟左葉部分切除為出血模型的實驗中,實驗組的止血成功率為88.9％,對照組為44.4％,空白組為0％；在出血量方面,實驗組的出血量0.23±

6、0.16也明顯低于對照組的0.43±0.31和空白組的0.56±0.33。肉眼觀察和病理組織切片觀察的結果都表明羧甲基殼聚糖具有更好的促進傷口愈合能力,并易于在體內降解吸收,不易形成粘連。3.在設定的各個時間點上,各個指標的實驗組和對照組之間差異均不顯著,說明羧甲基殼聚糖對大鼠血液系統(tǒng)無顯著影響。
　　 結論:本論文中使用的羧甲基殼聚糖具有良好的水溶性和降解性；止血、愈創(chuàng)能力優(yōu)于速即紗,且對血液系統(tǒng)無顯著影響,是一種安全有效的理