結(jié)腸癌相關(guān)抗原的制備及其性質(zhì)研究和臨床意義.pdf_第1頁(yè)
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1、裂解結(jié)腸癌細(xì)胞 LOVO,將制備的抗人結(jié)腸癌相關(guān)抗原單克隆抗體 4D10作為配基與溴化氰活化的 Sepharose 4B 交聯(lián),進(jìn)行免疫親和層析,從體外培養(yǎng)的人結(jié)腸癌LOVO細(xì)胞中純化4D10所識(shí)別的特異抗原,并用SDS-PAGE、Western blot對(duì)純化抗原進(jìn)行鑒定。用結(jié)腸癌細(xì)胞 LOVO 免疫家兔制備多抗,純化后鋪板,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的mAb4D10作為二抗,制備純化的與mAb4D10 特異結(jié)合的結(jié)腸癌相關(guān)抗原做陽(yáng)性對(duì)照,用

2、雙抗夾心ELISA法檢測(cè)結(jié)腸癌患者及正常人血清中該結(jié)腸癌相關(guān)抗原的表達(dá),從血清學(xué)角度探討該抗原在結(jié)腸癌臨床診斷中的意義。 結(jié)果分析表明:純化所獲與 4D10 特異結(jié)合的結(jié)腸癌相關(guān)抗原,其相對(duì)分子質(zhì)量 (Mr)約為65 000,該抗原由 M r約為30 000和35 000兩種亞基組成。人血清檢測(cè)實(shí)驗(yàn)表明,該抗原在結(jié)腸癌患者血清中有較高的表達(dá),與正常人血清相比存在顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。 利用mAb 4D10進(jìn)行

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