單-ADP-核糖基轉(zhuǎn)移酶3基因?qū)θ巳橄侔┰鲋?、調(diào)亡及侵襲的影響.pdf

1、本文從以下幾部分進行了論述。
　　第一部分單-ADP-核糖基轉(zhuǎn)移酶3基因過表達對人乳腺癌細胞增殖、凋亡及侵襲的影響。
　　目的:探討人單-ADP-核糖基轉(zhuǎn)移酶3（ART3，mono-ADP-ribosyltransferase3）基因?qū)θ橄侔┘毎?MDA-MB-231)增殖、凋亡、侵襲的影響。
　　方法:將人ART3基因重組真核質(zhì)粒pCMV-ART3-myc-tag轉(zhuǎn)染入人乳腺癌細胞MDA-MB-231，以G418進行

2、穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞株篩選。采用Western blot法檢測穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞中ART3蛋白的表達;MTT法檢測細胞增殖活力;流式細胞術檢測細胞凋亡;Transwell法檢測細胞侵襲能力。
　　結果:ART3基因在MDA-MB-231細胞中穩(wěn)定過表達。ART3轉(zhuǎn)染組細胞增殖和侵襲能力均高于未轉(zhuǎn)染組(P＜0.05);同時ART3過表達組細胞凋亡率明顯低于未轉(zhuǎn)染組(P＜0.05)。
　　結論:本實驗成功構建ART3基因穩(wěn)定過表達人乳腺癌 M

3、DA-MB-231細胞模型，且ART3基因能促進乳腺癌細胞增殖、侵襲并抑制凋亡，為進一步研究該基因在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用奠定了實驗基礎。
　　第二部分單-ADP-核糖基轉(zhuǎn)移酶3基因?qū)θ巳橄侔┘毎闶笠浦擦錾L的影響。
　　目的:探討單-ADP-核糖基轉(zhuǎn)移酶3基因?qū)DA-MB-231細胞裸鼠移植瘤生長的影響。
　　方法:用過表達ART3基因的MDA-MB-231乳腺癌細胞與未轉(zhuǎn)染的MDA-MB-231細胞構建裸鼠移植

4、瘤模型，成瘤后每3天對腫瘤體積進行測量，并根據(jù)數(shù)據(jù)繪制腫瘤生長曲線。成瘤30天后處死裸鼠，提取腫瘤組織中蛋白作western blot檢測ART3表達情況。
　　結果:裸鼠移植瘤模型構建成功，根據(jù)裸鼠移植瘤生長曲線，過表達ART3組移植瘤生長速度快與未轉(zhuǎn)染ART3組，腫瘤組織蛋白western blot結果顯示過表達ART3移植瘤中ART3表達顯著強于未轉(zhuǎn)染組。
　　結論:成功構建的裸鼠移植瘤模型中，ART3基因能促進MDA