糖基化磷脂酰肌醇特異性磷脂酶D在神經膠質瘤發(fā)生與侵襲中的作用.pdf

1、中南大學碩士學位論文糖基化磷脂酰肌醇特異性磷脂酶D在神經膠質瘤發(fā)生與侵襲中的作用姓名：段瓊申請學位級別：碩士專業(yè)：生物化學與分子生物學指導教師：唐建華20090501碩士學位論文中文摘要達到13156，而其它組細胞GPIPLD活性較低，分別為5730和5926。(3)GPIPLD穩(wěn)定轉染U251細胞后，細胞釋放uPAR明顯增加。pcDNA3I()／GPI—PLD／U251較pcDNA31()／U251、U251細胞組培養(yǎng)基上清uPAR濃

2、度顯著提高，增高水平達4倍，而pcDNA31()／U251和U251細胞組見無明顯差異。3GPI—PLD轉染前后U251細胞生物學特性的改變。(1)M11’法顯示pcDNA31()／GPI—PLD／U251、pcDNA31()／U251、U251細胞組吸光度的平均水平分別為039240104、063140187和062140194；其中，pcDNA31()／GPIPLD／U251組比pcDNA31()／U251和U251組吸光度值明顯下

3、降，差異有顯著性(PO01)，pcDNA31()／U251和U251組無明顯差異。表明GPIPLD基因過表達能抑制U251細胞的增殖。(2)細胞流式術顯示pcDNA31()／GPIPLD／U251、pcDNA31()／U251、U251細胞組S期細胞數分別為933％、1646％、171％；但細胞凋亡率沒有明顯差別。(3)體外侵襲實驗24h后，每個樣本分別計數5個視野。結果顯示pcDNA31()／GPI—PLD／U251、pcDNA31(

4、)／U251、U251三組細胞侵襲性顯著不同(P001)。pcDNA31()／GPIPLD／U251細胞侵襲性明顯低于pcDNA31()／U251、U251，提示GPIPLD能分解GPI錨，導致uPAR從細胞表面脫落，抑制其定位與uPA降解基質的功能和uPARuPA介導的信號轉導，從而降低U251細胞的體外侵襲性。結論：1神經膠質瘤患者腦脊液中GPIPLD酶活性以及uPAR的濃度均較正常人降低，差異具有顯著性。2成功將GPIPLD基因轉