露地菊品種‘紫秋裳’再生及遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立.pdf

1、露地菊(Dendranthema×grandiflora Ground-grow Chysanthemum)是菊花品種中耐寒性強(qiáng)，開(kāi)花繁茂，極具觀賞價(jià)值的花卉品種。自其育種成功后，就廣泛受到人們的關(guān)注和喜愛(ài)。本文主要研究添加各種激素配比的培養(yǎng)基對(duì)露地菊品種‘紫秋裳’的不同器官再生的影響，建立了露地菊‘紫秋裳’的再生體系，為露地菊的育種及品種改良奠定了理論基礎(chǔ)。初步建立了露地菊‘紫秋裳’的遺傳轉(zhuǎn)化體系，可為今后露地菊品種基因轉(zhuǎn)化的研究提供

2、參考依據(jù)。主要研究成果如下:
　　(1)建立了露地菊‘紫秋裳’的再生體系。2％的次氯酸鈉對(duì)露地菊‘紫秋裳’進(jìn)行消毒的最適時(shí)間為10min。露地菊‘紫秋裳’莖段增殖的最適培養(yǎng)基為MS+0.5mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1 NAA。露地菊‘紫秋裳’葉片的最適分化培養(yǎng)基為MS+0.5mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1 NAA。露地菊‘紫秋裳’的上部葉片分化的效果最好。露地菊‘紫秋裳’在組織培養(yǎng)室經(jīng)過(guò)20-30d的培養(yǎng)

3、，其葉片分化的效果最佳。露地菊‘紫秋裳’葉柄分化的最適培養(yǎng)基為:MS+0.5 mg· L-16-BA+1.0 mg·L-1 NAA。露地菊‘紫秋裳’莖段生根的最適培養(yǎng)基為1/2MS+0.05 mg·L-1 NAA。露地菊‘紫秋裳’煉苗和移栽容易成活，成活率高達(dá)88.89％。
　　(2)建立了露地菊‘紫秋裳’的遺傳轉(zhuǎn)化受體系統(tǒng)。卡那霉素篩選菊花離體葉片分化的最適臨界濃度為30 mg·L-1?？敲顾睾Y選菊花生根的最適臨界濃度為40m

4、g·L-1。頭孢霉素最適宜的脫菌濃度為200mg·L-1。
　　(3)初步建立了露地菊‘紫秋裳’的遺傳轉(zhuǎn)化體系。取露地菊‘紫秋裳’的無(wú)菌苗葉盤(pán)作為侵染材料，用含有綠色熒光蛋白標(biāo)記基因的農(nóng)桿菌EHA105進(jìn)行侵染。結(jié)果表明:外植體葉盤(pán)在預(yù)培養(yǎng)3d、侵染15min、與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)2d、延遲培養(yǎng)4d的轉(zhuǎn)化體系下，轉(zhuǎn)化率最高，為露地菊‘紫秋裳’葉盤(pán)進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化的最優(yōu)體系。供試外植體共計(jì)1890個(gè)，獲得轉(zhuǎn)化植株18株，轉(zhuǎn)化率為0.95％。熒