2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、研究背景及目的: 小腸移植是治療不可逆性小腸功能衰竭的最佳療法,但其5年存活率一直很低。小腸是慢性移植物失功(clironic graft dysf:unction,CGD)高發(fā)早發(fā)的器官,也是對缺血再灌注損傷(iscllemia/reperfusioninjury,IRI)最敏感的器官之一。IRI是導(dǎo)致小腸CGD發(fā)生發(fā)展的重要因素,缺血預(yù)適應(yīng)(isclneroic preconditioning,IPC)被公認為是當前防治IR

2、I最有希望和應(yīng)用前景的療法,但IPC在臨床上對小腸是否有保護作用仍存在爭論。轉(zhuǎn)錄因子激活蛋白-1(activator protein-1,AP-1)(c-fos和c-iun)參與細胞增殖、分化、轉(zhuǎn)化、細胞凋亡等病理生理過程。本研究旨在通過小鼠小腸IRI模型探討IPC對小腸IRI的保護作用,并觀察這一過程中c-fos和c-iun的變化,探討c-fos和c-jun在小腸IRI和IPC中的作用機制。 方法: 建立雄性C57BL

3、/6小鼠小腸IRI模型,分為sham組(假手術(shù))、IRI組(單純IRI)和IPC組(IPC+IRI)3組。采集3組術(shù)后再灌注0,30,60,90,120min小腸組織,HE染色觀察不同時間點小腸病理變化;RT-PCR檢測不同時間點c-fos和c-iun的mRNA表達;免疫組織化學(xué)檢測不同時間點小腸組織的c-Fos、c-Jun、PCNA、Caspase-3蛋白表達;TUNEL法檢測不同時間點小腸上皮細胞凋亡情況。 結(jié)果:

4、HE染色示正常小腸組織切片中小腸絨毛排列規(guī)則,粘膜上皮完整,絨毛無水腫變性或壞死。IRI組再灌注90分鐘后可見粘膜及絨毛水腫、排列紊亂,絨毛縮短,粘膜上皮壞死,脫落;IPC組再灌注90分鐘后,小腸絨毛結(jié)構(gòu)尚可,排列輕度紊亂,少量粘膜上皮壞死脫落,且較IRI組輕。 RT-PCR檢測結(jié)果顯示正常小腸組織c-los和c-iun mRNA呈低表達。與對照組相比,IRI組小腸組織中c-fos mRNA隨再灌注時間延長其表達強度不斷上升,再

5、灌注30min時達峰,之后開始下降;IRI組小腸組織中c-iun mRNA也隨再灌注時間延長其表達強度增強,再灌注60min時達峰,隨后下降。IPC組小腸組織中c-los與c-iunmRNA變化趨勢與IRI組類似,但峰值明顯低于IRI組,且有顯著性差異(p<0.05)。 免疫組織化學(xué)檢測顯示IRI組再灌注30-120min和IPC組再灌注60-120min c-Fos分子表達均高于對照組(p<0.05);IRI組再灌注30min

6、和60min時c-Fos分子表達明顯高于IPC組(p<0.05)。IRI組和IPC組c-Jun分子表達隨再灌注時間延長不斷增強,再灌注60-120min均明顯高于對照組(p<0.05);但IPC組增幅較IRI組低,再灌注60-120min兩組間c-Jun分子表達有顯著性差異(p<0.05)。IRI組PCNA于再灌注30min表達迅速增強(p<0.05),60min達峰(p<0.05),后下降;IPC組中PCNA表達也隨再灌注時間的延長而

7、不斷增強,但再灌注30min和60min時其表達明顯低于。IRI組(p<0.05)。隨再灌注時間延長,IRI組和IPC組Caspase-3分子的表達不斷增強,再灌注90-120min顯著高于對照組(p<0.05),但IPC組顯著低于IRI組(p<0.05)。 TUNEL染色顯示與對照組相比隨再灌注時間延長,IRI組和IPC組的凋亡指數(shù)(apoptosis index,AI)不斷升高,IRI組再灌注90-120min的AI是對照組的10-

8、22倍(p<0.05), IPC組再灌注90-120min的AI值高于對照組(p<0.05),但明顯低于IRI組(p<0.05)。 結(jié)論: IRI促使小腸粘膜上皮在再灌注30rain和60min時c-fos和c-junmRNA先后分別達峰。推測再灌注30min時,大量fos/jun二聚體復(fù)合物形成,促進細胞增殖;而再灌注60min時,大量jun/jun二聚體復(fù)合物形成,促進細胞凋亡。PCNA結(jié)果提示IRI早期增生活躍,T

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