晚期腎癌TKI治療相關的臨床與實驗研究.pdf

1、酪氨酸激酶抑制劑(TKI)能使晚期腎癌患者不同程度臨床獲益，但目前尚缺乏能夠準確評估患者療效及預后的臨床和分子生物學指標。而且毒副反應引起的停藥、減藥也可能增加患者治療失敗的風險。此外，臨床上缺乏更加精確有效的病情評估及監(jiān)測手段。故本研究對我中心TKI治療的晚期腎癌患者進行相關臨床和實驗研究，分析患者的臨床結(jié)果及影響預后的因素，探討CAIX、HIF-2α、VEGFR-2和VEGFR-3這4種缺氧相關蛋白作為患者療效與預后標志物的臨床價值

2、;通過分析血藥濃度與毒副反應的相關性，初步探討血藥濃度監(jiān)測對TKI治療晚期腎癌的臨床意義;并對SET-iFISH技術檢測腎癌患者外周血循環(huán)腫瘤細胞(CTC)的可行性進行初步研究，為CTC檢測在腎癌的診斷及分子靶向藥物治療中的應用提供理論依據(jù)。
　　第一部分、TKI治療晚期腎癌的臨床結(jié)果與相關分子標志物的檢測
　　目的:回顧性研究我中心TKI治療晚期腎癌患者的臨床結(jié)果，分析影響預后的因素，并探討CAIX、HIF-2α、VEGF

3、R-2和VEGFR-3作為患者療效與預后標志物的臨床價值。
　　材料和方法:對242例接受TKI治療的晚期腎癌患者的臨床資料進行回顧性研究，采用Kaplan-Meier法計算患者的無進展生存期(PFS)和總生存期(OS)。應用單因素和多因素Cox比例風險模型分析患者PFS和OS的影響因素，并對其中57例腎透明細胞癌(ccRCC)的組織標本進行CAIX、HIF-2α、VEGFR-2和VEGFR-3免疫組化檢測，分析這4種缺氧相關蛋白

4、的表達情況與患者療效和預后的相關性。
　　結(jié)果:本組患者中位PFS為11.4個月，中位OS為24.2個月，客觀緩解率為14.8％，疾病控制率為82.6％。多因素Cox比例風險模型評估顯示高ECOG評分、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和骨轉(zhuǎn)移是患者TKI治療后影響PFS和OS的獨立危險因素。CAIX、HIF-2α、VEGFR-2和VEGFR-3在ccRCC中均有不同程度表達，VEGFR-3表達陽性的患者更易發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（p=0.0433）。4種蛋白在

5、ccRCC中的表達情況與患者的PFS及最佳RECIST療效反應無顯著性相關。ccRCC的病理Furman分級是影響患者疾病進展的獨立危險因素(HR:2.141，95％ CI:1.222-3.752, p=0.0078)。
　　結(jié)論:TKI治療能使晚期腎癌患者不同程度臨床獲益。腎癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移可能與ccRCC中VEGFR-3的表達情況相關，但是通過檢測ccRCC組織中CAIX、HIF-2α、VEGFR-2和VEGFR-3的表達情

6、況尚不能作為晚期腎癌患者TKI治療療效和預后的指標?；颊叩念A后與體能狀態(tài)、是否發(fā)生淋巴結(jié)和骨轉(zhuǎn)移以及腫瘤的分化程度相關。
　　第二部分、TKI血藥濃度與毒副反應的相關性
　　目的:分析索拉非尼和舒尼替尼相關的毒副反應對治療及預后的影響。進一步研究血藥濃度與治療時藥物毒副反應的相關性，初步探討血藥濃度監(jiān)測的臨床意義。
　　材料和方法:分別分析164例索拉非尼和78例舒尼替尼治療的晚期腎癌患者的毒副反應對藥物治療劑量的影響

7、，以及與PFS、OS的相關性。進一步用液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜聯(lián)用技術(LC-MS/MS)檢測門診32例索拉非尼（69份血樣）和23例舒尼替尼（41份血樣）治療患者的血漿藥物穩(wěn)態(tài)谷值濃度（Ctrough，ss），分析索拉非尼、舒尼替尼及活性代謝產(chǎn)物(SU12662)的Ctrough，ss與患者毒副反應的相關性。
　　結(jié)果:分別有14.6％和62.8％服用索拉非尼和舒尼替尼治療的患者因毒副反應而劑量減量，但均未影響患者的總體PFS和OS

8、。服用索拉非尼出現(xiàn)高血壓的患者發(fā)生死亡的風險相對降低（HR:0.37，95％ CI:0.16-0.84，p=0.0177）。門診服用索拉非尼和舒尼替尼患者的Ctrough，ss存在較大的個體差異(CV=56.0％，CV=56.4％)。服用索拉非尼患者發(fā)生2級以上HFS的Ctrough，ss高于2級以下的患者;發(fā)生脫發(fā)患者Ctrough，ss高于無脫發(fā)患者;受試者工作特征曲線(ROC)顯示索拉非尼的最佳臨界濃度預測HFS≥2級和發(fā)生脫發(fā)的

9、Ctrough,ss分別為2669 ng/ml和4589 ng/ml。服用舒尼替尼發(fā)生高血壓的患者舒尼替尼和總藥物Ctrough,ss均高于未發(fā)生高血壓患者;ROC顯示舒尼替尼和總藥物最佳臨界濃度預測高血壓發(fā)生的Ctrough，ss為54.8 ng/ml和73.7ng/ml。
　　結(jié)論:因TKI毒副反應引起的劑量減量未影響患者的總體預后。脫發(fā)和HFS的發(fā)生與索拉非尼的血藥濃度相關，高血壓的發(fā)生與舒尼替尼的血藥濃度相關。服用TKI治

10、療的門診患者血藥濃度存在較大的個體差異，TKI血藥濃度監(jiān)測對患者的個體化治療具有潛在的臨床價值，但還需要更多的藥代動力學研究支持。
　　第三部分、SET-iFISH技術檢測腎癌患者外周血循環(huán)腫瘤細胞的研究結(jié)果
　　目的:初步探索SET-iFISH技術檢測腎癌患者外周血CTC的可行性，并為CTC檢測在腎癌診斷及分子靶向藥物治療中的應用提供理論依據(jù)。
　　材料和方法:選取9例各期腎癌患者（2例T4N1 M0，1例T3cN0

11、M0，1例T2aN0M0，1例T1bN0M0，3例T1aN0M0，1例TxN0M1）和1例腎結(jié)石患者作為陰性對照，采取外周血7.5ml。用磁珠偶聯(lián)的抗白細胞表面標記物CD45的單克隆抗體標記白細胞，并在磁場架中吸附去除白細胞達到富集作用。選用抗細胞角蛋白(panCK: CK4、5、6、8、10、13和18）的熒光抗體作為CTC的標記物進行瘤標免疫熒光染色，同時對8號染色體進行染色體熒光原位雜交(FISH)檢測，對患者外周血的CTC進行定

12、量分析。
　　結(jié)果:6例腎細胞癌患者外周血CTC定量檢測結(jié)果為陽性（2例T4N1M0、1例T3cN0M0、2例T1aN0M0、1例T1bN0M0），3例腎癌患者為陰性(TxN0M1、T1aN0M0、T2aN0M0各1例)，1例對照者為陰性。3例腎癌患者外周血中發(fā)現(xiàn)循環(huán)腫瘤微栓子(T1 bN0M0、T4N1M0、T1aN0M0各1例)。6例CTC陽性患者均通過8號染色體的熒光原位雜交定性，panCK熒光抗體染色均陰性。
　　結(jié)