功能磁性納米顆粒在原發(fā)性高血壓易感性研究中的應用.pdf

1、研究復雜疾病背后的遺傳作用有助于有效藥物的開發(fā)。原發(fā)性高血壓是最常見的心血管疾病，其發(fā)病率逐年上升，是遺傳因素與環(huán)境因素綜合作用的結(jié)果，原發(fā)性高血壓呈家族聚集現(xiàn)象進一步說明遺傳基因的存在。而腎素-血管緊張素系統(tǒng)(Renin-angitensin System，RAS)基因群中血管緊張素原(Angiotensinogen AGT)基因與原發(fā)性高血壓(Essential Hypertension EH)相關(guān)性的研究成為人們關(guān)注的焦點。

2、>　　為了進一步揭示 AGT基因與原發(fā)性高血壓的相關(guān)性，我們對AGT基因兩個多態(tài)位點：M235T位點和A-6G位點與湖南地區(qū)原發(fā)性高血壓的易感相關(guān)性進行了研究。
　　我們制備了平均粒徑為30 nm的γ-Fe2O3顆粒，顆粒的飽和磁化強度為48.4 emu/g，具有超順磁性，并對其進行了鏈霉親和素修飾，實驗證明鏈霉親和素修飾的γ-Fe2O3磁性顆粒具有很好的生物活性，可以進一步用于生物檢測。利用生物素與鏈霉親和素系統(tǒng)的超強特異結(jié)合作

3、用，將鏈霉親和素修飾的γ-Fe2O3磁性顆粒應用于下一步SNP分型檢測中。本文中，我們收集了湖南地區(qū)243例原發(fā)性高血壓樣本，247例正常對照樣本，并對血管緊張素原基因中的兩個最受關(guān)注的位點M235T位點和A-6G位點進行易感性研究。首先擴增生物素標記的PCR產(chǎn)物，將其固定于鏈霉親和素標記的磁性納米顆粒上，然后與雙色熒光標記（Cy3和Cy5）的等位基因特異性探針進行雜交；最后通過掃描以獲得樣本的基因型。利用該方法，我們成功地對來自243

4、個高血壓及正常樣本的2個位點進行了分型，對于純合型樣本，其正錯配信號強度比均大于3，雜合型樣本其Cy3：Cy5信號強度比介于0.64和1.7之間，分型方法經(jīng)測序驗證。
　　通過用SPSS13.0分析軟件對分型結(jié)果進行統(tǒng)計學分析，發(fā)現(xiàn)原發(fā)性高血壓病例組血管緊張素原基因M235T位點CC，CT，TT基因型頻率與正常對照組比較差異有顯著性意義(χ2=5.532，P=0.063)；C，T等位基因頻率與正常對照組比較差異有顯著性意義(χ2=