甘薯抗病相關(guān)基因SGT1的克隆與表達(dá)研究.pdf

1、甘薯是一種重要的農(nóng)作物，不僅是單一的糧食作物，更是重要的工業(yè)原料，其產(chǎn)業(yè)近年來一直處于持續(xù)發(fā)展的過程中。但由于甘薯種苗在調(diào)運過程中沒能進(jìn)行有效的檢疫，以及在種植過程中的防治措施不足等原因，導(dǎo)致病株傳播，以至于甘薯病害程度日益加重，嚴(yán)重影響了甘薯的產(chǎn)量與質(zhì)量，因此，迫切需要研究出抗病新品種以解決該問題。
　　本研究以甘薯為材料，利用RT-PCR獲得的甘薯SGT1的cDNA片段，并以此為基礎(chǔ)，利用RACE技術(shù)對SGT1基因的全長cDN

2、A序列進(jìn)行擴(kuò)增。構(gòu)建植物表達(dá)載體后轉(zhuǎn)化煙草。本研究通過克隆SAR途徑的主要抗病信號元件SGT1為甘薯抗病基因工程提供新的基因源，從而為培育抗病新品種的可行性提供一定的理論及實踐依據(jù)。具體研究結(jié)果如下：
　　1、成功獲得了一個大小為191bp的cDNA序列，將所得序列提交NCBI網(wǎng)站進(jìn)行比對分析后發(fā)現(xiàn)，與數(shù)據(jù)庫中多種植物的SGT1基因相似性較高，推測所獲得的序列為甘薯SGT1基因片段；
　　2、分別擴(kuò)增SGT1基因3’端和5’

3、端序列，并對序列進(jìn)行拼接后獲得SGT1基因全長cDNA序列，編碼序列全長為1107bp，能夠編碼369個氨基酸。提交NCBI網(wǎng)站中進(jìn)行BLAST分析，發(fā)現(xiàn)序列含有TPR、CS和SGS三個保守結(jié)構(gòu)域，與數(shù)據(jù)庫中多種植物的SGT1基因相似性較高，推測所獲得的甘薯cDNA序列為SGT1基因的相關(guān)序列；利用RT-PCR技術(shù)對SGT1基因的轉(zhuǎn)錄情況研究表明，SGT1基因在甘薯的根、莖與葉中均有表達(dá)，無明顯組織特異性；
　　3、以pRI101