應(yīng)用γ-H2AX分析技術(shù)評(píng)價(jià)工頻磁場(chǎng)對(duì)不同細(xì)胞DNA雙鏈斷裂的影響.pdf

1、目的:工頻磁場(chǎng)是頻率為50Hz的極低頻磁場(chǎng)，隨著人們接觸頻率及強(qiáng)度的提高，工頻磁場(chǎng)的生物學(xué)效應(yīng)引起了研究者的極大關(guān)注，有關(guān)工頻磁場(chǎng)對(duì)細(xì)胞DNA損傷修復(fù)的影響成為評(píng)價(jià)其健康風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)鍵事件之一，但迄今為止有關(guān)其遺傳損傷效應(yīng)的研究報(bào)道尚無(wú)確切定論。本研究采用DNA雙鏈斷裂的早期敏感指標(biāo)-γH2AX，初步評(píng)價(jià)了工頻磁場(chǎng)不同輻照強(qiáng)度和時(shí)間對(duì)三種不同系統(tǒng)或器官來(lái)源細(xì)胞的DNA損傷效應(yīng)，以期為工頻磁場(chǎng)敏感細(xì)胞的篩選及其進(jìn)一步的生物學(xué)效應(yīng)研究奠定基礎(chǔ)。

2、
　　 方法:將人羊膜上皮細(xì)胞(FL)、人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)以及人皮膚成纖維細(xì)胞(HSF)分別暴露于50Hz，0.4mT、1mT和2mT工頻磁場(chǎng)15min、1h和24h后，采用γH2AX免疫熒光法和免疫印跡法分別檢測(cè)了細(xì)胞內(nèi)DNA雙鏈斷裂和γH2AX表達(dá)情況。每個(gè)強(qiáng)度和時(shí)間點(diǎn)分別設(shè)置一一對(duì)應(yīng)假暴露組，同時(shí)采用0.5μM或1μM4NQO處理1h作為陽(yáng)性對(duì)照組。其中，γH2AX免疫熒光實(shí)驗(yàn)采用平均焦點(diǎn)數(shù)、焦點(diǎn)陽(yáng)性細(xì)胞率以及