日本血吸蟲感染對(duì)飲食誘導(dǎo)的C57BL-6J脂肪肝小鼠肝組織TNF-α, NF-kB及Ym-1 mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、目的：觀察日本血吸蟲感染對(duì)高脂飲食誘導(dǎo)的C57BL/6J脂肪肝小鼠肝臟組織結(jié)構(gòu)與功能、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、核因子-kB(nuclear factor kappa B,NF-kB)及巨噬細(xì)胞選擇性活化標(biāo)志物Ym-1 mRNA水平在肝臟組織中表達(dá)的影響,探討血吸蟲感染后巨噬細(xì)胞選擇性活化對(duì)肥胖小鼠肝臟及胰島素抵抗的影響及可能機(jī)制。
　　方法：36只雄性C57BL/6J小鼠,隨

2、機(jī)分為正常對(duì)照(NC,n=12)組、高脂飲食(HF,n=12)組及高脂飲食復(fù)合日本血吸蟲感染(HSj,n=12)組。HF組經(jīng)高脂飲食建立肥胖模型,HSj組經(jīng)高脂飲食及日本血吸蟲感染建立肥胖復(fù)合血吸蟲感染模型。分別于高脂喂養(yǎng)第6周末及12周末時(shí)檢測(cè)空腹血糖（fasting peripheral blood glucose,FBG)、空腹血漿胰島素(fasting plasma insulin,FINS)水平,并計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)(insu

3、lin resistance index,HOMA-IR),檢測(cè)肝組織勻漿谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alanine aminotransferase,ALT)、甘油三酯（triglyceride,TG)及膽固醇(cholesterol,TC)水平;HE染色觀察肝組織病理改變,逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-RCR)檢測(cè)肝臟組織TNF-α和NF-kB及M2型巨噬

4、細(xì)胞的特異性標(biāo)志物Ym-1 mRNA表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1.高脂喂養(yǎng)第6周末時(shí),HF組及HSj組小鼠體重均較NC組增加?20％,肥胖模型造模成功。第12周末時(shí),HF組體重較NC組增加,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),HSj組體重與NC組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但低于HF組(P<0.05)。
　　2.第6周末時(shí)HF組FINS、HOMA-IR較NC組升高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),HF組FBG較NC組升高差異無(wú)統(tǒng)計(jì)

5、學(xué)意義,HSj組HOMA-IR較HF組顯著下降(P<0.05),而HSj組FBG、FINS與HF組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。第12周末時(shí)HF組FBG、FINS、HOMA-IR均進(jìn)一步升高且明顯高于同期NC組(P<0.05),HSj組FBG、FINS、HOMA-IR均較同期HF組下降(P<0.05)。
　　3.第6周末HF組小鼠肝勻漿TG較NC組升高有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),TC及ALT含量與NC組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。HSj組TC、T

6、G水平較HF組下降(P<0.05),ALT變化不明顯。12周末時(shí)HF組肝勻漿TC、TG、ALT進(jìn)一步較NC組升高(P<0.05),HSj組TC、TG較同期HF組下降有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),但ALT升高(P<0.05)。
　　4.肉眼觀,在第6周末時(shí),NC組小鼠肝臟紅潤(rùn),HF組小鼠肝臟邊緣變鈍、微黃色,可見(jiàn)黃色脂肪斑,HSj組小鼠肝臟呈紅褐色,體積較HF組肝臟小,可見(jiàn)顆粒狀結(jié)節(jié);第12周末時(shí),NC組小鼠肝臟外觀無(wú)明顯異常,HF

7、組及HSj組小鼠肝臟上述表現(xiàn)更加明顯。
　　5.光學(xué)顯微鏡下,在第6周末和第12周末NC組小鼠肝組織HE染色均未見(jiàn)明顯異常。第6周末時(shí)HF組小鼠肝細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)大小不等的脂滴空泡,第12周末肝細(xì)胞內(nèi)脂滴空泡更加明顯,可見(jiàn)氣球樣變及纖維化,HSj組小鼠第6周末可見(jiàn)少量大小不等的脂滴空泡及肝細(xì)胞壞死,第12周末時(shí)肝細(xì)胞壞死和肝纖維化加重。第6周末及第12周末HF組肝小葉內(nèi)及匯管區(qū)均可見(jiàn)炎性細(xì)胞浸潤(rùn),較同期HSj組浸潤(rùn)增多。
　　6.

8、RT-PCR在第6周和第12周末時(shí)檢測(cè)HF組TNF-αmRNA及NF-kB mRNA表達(dá)均高于HSj組和NC組(P<0.05)。第6周末時(shí),HF組Ym-1 mRNA的表達(dá)高于NC組和HSj組(P<0.05),第12周末時(shí)HSj組Ym-1 mRNA表達(dá)強(qiáng)度高于HF組和NC組(P<0.05),且較6周時(shí)表達(dá)增強(qiáng)(P<0.05)。
　　7.HF組小鼠HOMA-IR與肝組織TNF-αmRNA光密度相對(duì)值呈正相關(guān)(P<0.05),與NF-k

9、B mRNA光密度相對(duì)值無(wú)顯著相關(guān)性(P?0.05);HSj組小鼠HOMA-IR與肝組織Ym-1mRNA光密度相對(duì)值呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.高脂飲食可誘導(dǎo)C57BL/6J肥胖小鼠及脂肪肝模型的建立,該模型具有胰島素抵抗的特征。
　　2.肥胖小鼠脂肪肝組織中炎癥因子TNF-α及調(diào)控因子NF-kB的表達(dá)水平與胰島素抵抗的形成有一定的關(guān)系。
　　3.日本血吸蟲感染可以增強(qiáng)肥胖小鼠脂肪肝肝組織中M