Il-22介導的STAT3信號通路對小鼠急性重癥胰腺炎的保護作用研究.pdf

1、目的：急性重癥胰腺炎(acute severe pancreatitis，SAP)是臨床常見急危重癥之一，以病情進展快、并發(fā)癥多、病死率高為特點。因其確切發(fā)病機制尚不明確，目前治療方案多為對癥處理，缺乏特異性的治療。IL-22作為一種保護因子，在多種原因引起的肝臟、肺臟、腸道損傷等動物模型中，發(fā)揮著組織修復(fù)，維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的重要作用。本實驗擬采用腹腔注射大劑量左旋精氨酸的方法制備小鼠SAP模型，并通過給予外源性重組IL-22，對其在小鼠

2、SAP中的作用及機制進行初步探討。
　　方法：60只雄性Balb/c小鼠隨機分成正常對照組(NaCl組)、急性重癥胰腺炎組（SAP組）、PBS治療組（PBS組）和rIL-22治療組（rIL-22組）。NaCl組(10只):注射等量0.9％ NaCl; SAP組（30只）:采用8％左旋精氨酸(pH=7.0)按4 g/kg體質(zhì)量分2次腹腔注射;PBS組（10只）:在左旋精氨酸造模前后應(yīng)用PBS（200 ng/次×5次）在相應(yīng)時間點進行

3、腹腔注射;rIL-22組（10只）:在左旋精氨酸造模前后應(yīng)用rIL-22（200 ng/次×5次）在相應(yīng)時間點進行腹腔注射。光鏡下觀察各組胰腺組織病理學改變，檢測各組血清淀粉酶變化。Real-time PCR法檢測各組胰腺組織中Reg3β、Reg3γ、 Bcl-2、Bcl-xL和IL-22RA1 mRNA表達水平的變化。Western blotting方法檢測各組胰腺組織STAT3和P-STAT3蛋白的表達情況。并統(tǒng)計PBS組和rIL-

4、22組的死亡率。
　　結(jié)果：⑴NaCl組胰腺組織結(jié)構(gòu)清晰，細胞形態(tài)完整，無炎癥細胞浸潤;SAP組，24 h可見胰腺間質(zhì)水腫，少量炎癥細胞浸潤，胰腺小葉呈小片狀破壞，腺泡細胞壞死多發(fā)生在小葉邊緣，到72h時僅見少數(shù)正常胰腺小葉呈孤島狀分布，大部分腺泡細胞被破壞，出現(xiàn)大片壞死區(qū)，大量炎癥細胞浸潤;rIL-22組小鼠胰腺水腫、壞死、炎癥細胞浸潤均較PBS組明顯減輕。⑵NaCl組小鼠血清淀粉酶在正常范圍;SAP組小鼠血清淀粉酶活性隨時間推

5、移呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢。rIL-22組小鼠血清淀粉酶較PBS組顯著下降（P＜0.05）。⑶PBS組小鼠，死亡率達30％; rIL-22組小鼠無死亡(P＜0.05)。⑷SAP組各時間點Reg3β和Reg3γ、 Bcl-2和Bcl-xL mRNA的表達水平均低于NaCl組，并隨時間延長，表達量逐漸下降。IL-22RA1 mRNA的表達在各時間點均較NaCl組升高。與PBS組相比，rIL-22組胰腺組織各基因的表達水平明顯升高(P＜0.05