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1、分類號:R7342密級:內(nèi)部2年學位類別:科學學位口專業(yè)學位團學校代碼:10062學號:2011601070學科門類:醫(yī)學夭肄譬科袁等Ill萋毳黼JI圈嬲毫O|霉;蠢IlI辣麓I垤黯11警博士學位論文DOCToRALDISSERTATIoN論文題目:地拉羅司通過Wnt信號通路抑制肺癌A549細胞,及其機制的研究TITLEMechanismsonWntSignalingPathwayInhibitingtheProliferationin
2、HumanLungAdenocarcinomaA549CellsbyDeferasirox一級學科:臨床醫(yī)學二級學科:外科學胸心外科論文作者:梁吉祥指導教師:張遜導師組成員:孫大強徐醫(yī)軍天津醫(yī)科大學研究生院二O一四年五月天津醫(yī)科大學博士學位論文中文摘要目的:1通過研究地拉羅司對A549細胞增殖、凋亡以及鐵代謝相關(guān)基因及其表達產(chǎn)物的影響,從細胞水平探討鐵螯合劑對肺癌增殖的作用及機制。2采用接種裸鼠,創(chuàng)建異種移植瘤模型,研究地拉羅司對A54
3、9細胞致瘤能力的影響,探討地拉羅司對肺癌生長的影響。3觀察不同濃度的地拉羅司在體外對肺癌A549細胞核蛋白pcatenin和信號通路下游cmyc基因表達的調(diào)控,探討地拉羅司可能存在的抑制肺癌細胞增殖的分子學機制。方法:1。常規(guī)傳代細胞培養(yǎng)方法培養(yǎng)肺腺癌細胞A549,分別以不同濃度(0320pM)的地拉羅司干預細胞生長24和48h后,MTT法檢測肺癌細胞的生長抑制情況,應用流式細胞儀檢測細胞中凋亡率的變化,分析地拉羅司對細胞凋亡的影響,分
4、析藥物濃度和細胞增殖抑制率之間的關(guān)系。RT—PCR檢測各組細胞鐵代謝相關(guān)指標Tf、TfRl、Fn、FNP的mRNA水平。24~5周雌性BALB/C(nu/nu)鼠分為對照組和實驗組各8只,皮下植入肺癌A549細胞,腫瘤體積達100mm3后,實驗組隔日用地拉羅司40mg/kg,對照組采用等量生理鹽水連續(xù)灌胃,治療3周后處死。觀察成瘤時間、瘤體平均體積、平均瘤重和血液生化指標。3,不同濃度地拉羅司作用后,RT—PCR檢測各組細胞Cmyc、1
5、3catenin基因表達的mRNA水平。Westernblot檢測各組細胞cmyc、13catenin的蛋白表達,進而探討地拉羅司的分子學機制。爭士甲三口木:l,不同濃度地拉羅司對A549細胞生長有抑制作用,與對照組比較差異具有統(tǒng)計學意義舊0001)。隨著濃度的增加,抑制增殖作用增強。隨著時間延長,地拉羅司80pm/L、160pm/L、3209m/L組48h抑制增殖作用強于24h,48h抑制增殖的作用與24h相比,差異有統(tǒng)計學意義(P0
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