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1、目的:觀察GOLPH3、Wnt/β-catenin對(duì)腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的影響;探討GOLPH3調(diào)節(jié)腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的機(jī)制。
方法:采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法在膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞中用siRNA下調(diào)GOLPH3的表達(dá),觀察以下指標(biāo)變化。(1)應(yīng)用Western Blot法檢測(cè)干擾效率。(2)應(yīng)用WesternBlot法檢測(cè)對(duì)Wnt2的蛋白水平的影響。(3) Edu法檢測(cè)對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的影響。
采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法在膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞中
2、用siRNA下調(diào)Wnt2的表達(dá),觀察以下指標(biāo)變化。(1)應(yīng)用Western Blot法檢測(cè)干擾效率。(2)應(yīng)用Western Blot法檢測(cè)對(duì)β-catenin、GOLPH3的蛋白水平的影響。(3) Edu法檢測(cè)對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的影響。
采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法在膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞中用siRNA下調(diào)β-catenin的表達(dá),觀察以下指標(biāo)變化。(1)應(yīng)用Western Blot法檢測(cè)干擾效率。(2) Edu法檢測(cè)對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的影響。
3、
結(jié)果:1.下調(diào)GOLPH3后可以降低Wnt2的蛋白表達(dá)水平,抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖。
2.下調(diào)Wnt2后可以降低其下游β-catenin的表達(dá)水平;下調(diào)Wnt2、β-catenin能夠抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖。
結(jié)論:1.下調(diào)GOLPH3后可以降低Wnt2蛋白的表達(dá)水平,抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖。
2.下調(diào)Wnt2后可以減小其下游β-catenin的表達(dá),并且能夠抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖。
3.GO
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