不同時(shí)間間隔自體骨髓移植治療骨不連的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：盡管骨愈合能力很強(qiáng)，但仍有5％～10％的骨折愈合受到干擾，導(dǎo)致骨不連，因此骨不連仍是目前骨折治療需面臨的重要難題之一，也是創(chuàng)傷骨科的主要問題。
　　 骨髓具有成骨活性，許多作者的試驗(yàn)研究及初步臨床應(yīng)用，也充分肯定了自體骨髓移植的成骨潛力。本實(shí)驗(yàn)首先建立骨不連模型，通過(guò)對(duì)各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物骨折端不同時(shí)間間隔注入骨髓原液（或外周血），然后通過(guò)X線攝片、骨密度測(cè)定及組織學(xué)觀察等，探討不同時(shí)間間隔自體骨髓移植對(duì)骨不連愈合的影響，為臨床自

2、體骨髓移植治療骨不連提供可靠的依據(jù)。
　　 方法：選用健康新西蘭白兔40只，兔齡4～6周，體重2.5～3.0kg，15％噻胺酮肌注麻醉（30mg/kg），在常規(guī)無(wú)菌操作下，在前肢中段內(nèi)側(cè)作長(zhǎng)2cm縱形切口，顯露橈骨，分開尺橈骨間膜，在距肘關(guān)節(jié)3.5cm處截除帶有骨膜的橈骨1.0cm，生理鹽水徹底沖洗，清理切口內(nèi)的碎骨片，用骨蠟將骨折端骨髓腔封閉，于骨缺損周圍切取0.5×0.8×1.5cm3肌肉組織嵌于骨缺損處，逐層關(guān)閉切口。不必

3、行任何內(nèi)、外固定。待2個(gè)月后骨不連模型制作成功。將所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為兩組：A組：20d間隔組；B組：40d間隔組。將各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物骨折端，在C型臂引導(dǎo)下用小針刀松解骨折端斑痕組織后，A組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物右側(cè)（實(shí)驗(yàn)側(cè)）骨折處分別分別于第1d、21d、41d注入骨髓原液2ml，對(duì)照側(cè)同時(shí)注入外周血2ml，B組實(shí)驗(yàn)側(cè)骨折端分別于第1d、41d注入骨髓原液2ml，對(duì)照側(cè)同時(shí)注入外周血2ml。將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分別于術(shù)后第11d、21d、31d、41d、61d，

4、兩組隨機(jī)抽取4只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，進(jìn)行X線攝片、骨密度測(cè)定及組織學(xué)觀察等，評(píng)價(jià)骨折愈合情況及骨痂質(zhì)量。整理數(shù)據(jù)，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，得出結(jié)論。
　　 結(jié)果：
　　 1.X線表現(xiàn)
　　 1.1實(shí)驗(yàn)側(cè)各組不同時(shí)期的X線表現(xiàn)。術(shù)后11d兩組表現(xiàn)大致相同：骨折端有少量毛玻璃狀骨痂形成，均出現(xiàn)條帶狀高密度影，附近存在骨膜反應(yīng)，可見骨皮質(zhì)缺損。術(shù)后21天兩組表現(xiàn)大致相同：骨缺損處可見半透明狀的骨痂形成，密度仍較正常骨質(zhì)低且密度不均勻。術(shù)后

5、31d：兩組骨缺損處均可見連續(xù)骨痂形成，骨痂密度A組高于B組。術(shù)后41d：A組骨缺損處骨折愈合好，骨皮質(zhì)連續(xù)行存在。新生骨中間可見低密度骨髓腔形成；B組骨缺損處可見連續(xù)骨痂形成，骨痂密度較正常骨質(zhì)密度稍低。術(shù)后61 d：A組骨缺損處骨折愈合良好，骨皮質(zhì)連續(xù)行存在，橈骨骨髓腔已再通，但骨折塑形期尚未完成；B組骨缺損處骨折愈合可，骨皮質(zhì)連續(xù)行存在，可見低密度骨髓腔形成。
　　 1.2兩組對(duì)照側(cè)在同一時(shí)期的表現(xiàn)基本相同，不同時(shí)期的表現(xiàn)

6、也相近。術(shù)后11d和21d骨缺損區(qū)無(wú)骨性連接，骨折端可見少量硬化骨，骨髓腔閉塞；31d骨折端無(wú)骨性連接及骨痂形成跡象，骨髓腔閉塞；41d和61d骨折端無(wú)明顯骨痂形成，骨折端吸收、硬化。
　　 2.光鏡組織學(xué)觀察
　　 2.1實(shí)驗(yàn)側(cè)各組不同時(shí)期的光鏡表現(xiàn)。術(shù)后11d兩組表現(xiàn)大致相同：可見纖維瘢痕組織之間有大量增生活躍的骨基質(zhì)細(xì)胞和小量毛細(xì)血管增生。術(shù)后21d兩組表現(xiàn)大致相同：可見大量毛細(xì)血管增生，軟骨骨痂形成，組織增生活躍

7、，有較多粗大新生骨小梁形成，呈條索狀，其外周有大量成骨細(xì)胞。術(shù)后31d：A組可見大量網(wǎng)狀骨小梁、早期哈佛系統(tǒng)形成，但骨小梁及哈佛系統(tǒng)排列紊亂；B組纖維組織與骨痂并存，可見不連續(xù)骨痂形成及早期哈佛系統(tǒng)逐步形成，但排列紊亂。纖維組織逐漸被骨組織代替。術(shù)后41d：A組編織骨進(jìn)一步成熟并逐漸融合，新骨連接成片，骨小梁間隙縮小，未見明顯軟骨、血腫及纖維組織等組織，但骨小梁排列欠規(guī)則，骨小梁較寬、不致密；B組可見大量網(wǎng)狀骨小梁和哈佛系統(tǒng)形成，排列較

8、紊亂，纖維組織相對(duì)較少。術(shù)后61d：A組新生骨已有骨改建，可見板層骨形成，皮質(zhì)骨均勻致密，可見大量新生血管；B組：骨痂成熟并逐漸融合，新骨連接成片，骨小梁間隙縮小，但排列欠規(guī)則，骨小梁較寬、不致密。
　　 2.2各時(shí)期各組對(duì)照側(cè)均可見大量纖維組織增生，未見明顯骨痂形成。
　　 3.骨密度檢測(cè)及組織學(xué)評(píng)分
　　 兩組實(shí)驗(yàn)側(cè)骨折端骨缺損區(qū)的骨密度及組織學(xué)評(píng)分呈增加趨勢(shì)，A組更為明顯，呈進(jìn)行性增加。對(duì)照側(cè)無(wú)明顯增加趨勢(shì)

9、。不同時(shí)期各組實(shí)驗(yàn)側(cè)與對(duì)照側(cè)之間對(duì)比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。術(shù)后31d、41d、61d兩組實(shí)驗(yàn)側(cè)對(duì)比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 4.B組前41天骨密度及骨愈合的組織學(xué)評(píng)分不同階段的增量呈低-高-低趨勢(shì)，主要增量集中在前30天，高峰出現(xiàn)在10-20天。
　　 結(jié)論：
　　 1.自體骨髓移植可以提高骨折愈合速度及質(zhì)量，是治療骨折不愈合及骨不連的可靠的方法。
　　 2.自體骨髓移植治療骨不連中，適當(dāng)時(shí)間間隔的骨髓重復(fù)注射能更