當(dāng)歸多糖的結(jié)構(gòu)分析及其對(duì)2型糖尿病動(dòng)物模型影響的初步探討.pdf

1、近年來，由于新藥物資源的尋找與開發(fā)，具有廣闊的臨床應(yīng)用前景，中藥多糖的研究受到越來越廣泛的重視。中醫(yī)動(dòng)物模型己成為中醫(yī)藥現(xiàn)代化研究的重要組成部分。標(biāo)準(zhǔn)化的動(dòng)物模型的復(fù)制對(duì)于探明疾病的病因、發(fā)病機(jī)制及防治藥物的研究與開發(fā)均具有重要的意義。 本文從中藥多糖研究及其應(yīng)用出發(fā)，對(duì)中藥多糖的提取、分離、純化、結(jié)構(gòu)分析方法、活性研究以及臨床應(yīng)用和中藥動(dòng)物模型的發(fā)展及其應(yīng)用狀況進(jìn)行了歸納總結(jié)。 本實(shí)驗(yàn)主要目的是在前人已建立的中藥動(dòng)物模

2、型的基礎(chǔ)上，選取當(dāng)歸多糖對(duì)2型糖尿病動(dòng)物模型(NIDDM)進(jìn)行治療，從當(dāng)歸多糖對(duì)糖尿病胰島素抵抗的影響來探究當(dāng)歸多糖對(duì)NIDDM的作用，從而建立新的中藥動(dòng)物模型。 首先選取中藥當(dāng)歸，提取多糖，對(duì)其多糖的理化性質(zhì)及其結(jié)構(gòu)進(jìn)行初步研究，為下一步建立糖尿病小鼠實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ吞峁┧幚砘A(chǔ)。然后采用中劑量鏈尿佐菌素(STZ)來建立實(shí)驗(yàn)性2型糖尿病小鼠模型，再用當(dāng)歸多糖給與一定時(shí)間的藥物治療，以此研究當(dāng)歸多糖對(duì)實(shí)驗(yàn)性2型糖尿病小鼠的影響。主要實(shí)驗(yàn)

3、觀察指標(biāo)為各組小鼠空腹血糖變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 1、當(dāng)歸多糖的提取及結(jié)構(gòu)初步研究：本實(shí)驗(yàn)采用熱水浸提法得到當(dāng)歸總多糖AP0，然后采用CTAB法從AP0中分離出三種不同的亞組分，分別為AP1、AP2和AP3。苯酚硫酸法測(cè)得多糖含量分別為AP0為89.1％，AP1為81.5％，AP2為76.3％，AP3為78.6％。通過光譜分析顯示，四種多糖具有多糖共同的光譜特性，初步認(rèn)為AP0、AP1、AP2和AP3為a-D-葡萄吡喃型。原子力顯

4、微鏡研究表明當(dāng)歸多糖大分子具有高度分枝的化學(xué)結(jié)構(gòu)，單個(gè)的分子鏈及其多個(gè)側(cè)枝，聚合物鏈分子間互相纏繞，鏈間通過糖單元間不同的連接方式衍生出許多大大小小的環(huán)狀、棒狀或者近似于螺旋狀的結(jié)構(gòu)。 2、當(dāng)歸多糖衍生化及其結(jié)構(gòu)的初步研究：分別通過溶劑法和氯磺酸.吡啶法獲取羧甲基化和硫酸酯化當(dāng)歸多糖。紅外光譜鑒定羧甲基化當(dāng)歸AP0在1609cm<'-1>處有-COO-特征吸收峰，在1420 cm<'-1>處有較強(qiáng)的次甲基振動(dòng)吸收，這兩個(gè)吸收都表

5、明了羧甲基的存在，發(fā)生了羧甲基化。硫酸酯化后的當(dāng)歸多糖除了具有多糖特征吸收峰外，在823cm<'-1>處C-O-S伸縮振動(dòng)的吸收峰，1254cm<'-1>處有硫酸酯基的特征吸收峰，初步判定當(dāng)歸多糖發(fā)生了硫酸基的取代。 3、當(dāng)歸多糖對(duì)糖尿病小鼠的影響：30只C<,57>BL/6J小鼠隨機(jī)分成兩組，模型組20只，每只腹腔注射1％STZ 50mg/kg，對(duì)照組(A組，10只)注射等量的緩沖液，3天后裁尾取血檢測(cè)血糖濃度。造模成功后，將