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文檔簡介
1、目的探討胰腺癌組織E-cad和TIMP-3兩種腫瘤抑制基因的5'-CpG島甲基化情況;以及E-cad基因甲基化與蛋白表達之間的關系.以期對胰腺癌浸潤和轉(zhuǎn)移機制作初步探索和DNA異常甲基化在臨床早期診斷、治療中的應用.方法我們收集了胰十二指腸切除術的27例胰腺癌組織和6例癌旁正常胰腺組織、5例胰腺良性腫塊.應用甲基化特異性PCR檢測E-cad和TIMP-3兩種腫瘤抑制基因5'-CpG島甲基化情況;應用免疫組化(S-P法)檢測E-cad蛋白
2、表達.檢驗DNA甲基化與蛋白表達及臨床、病理因素之間的關系.分析TIMP-3基因和E-cad基因異常甲基化的相關性.結(jié)論(1)、胰腺癌E-cad和TIMP-3基因CpG島異常甲基化是一種普遍現(xiàn)象,兩者發(fā)生甲基化有明顯的相關性.DNA甲基化陽性是胰腺癌區(qū)別于其它胰腺良性組織的生物學標志之一.(2)、E-cad基因啟動子異常甲基化是導致蛋白表達失活的主要原因之一,但并不是唯一的原因,可能還存在著其它機制.5-Azacytidine誘導腫瘤細
3、胞E-cad的表達和對侵襲抑制作用的研究目的DNA甲基化作為腫瘤細胞的一種廣泛的表遺傳調(diào)控方式,在去甲基化治療恢復抑癌基因DNA非甲基化狀態(tài)后是否會誘導基因重新表達?同時,去甲基化后是否能降低腫瘤細胞的粘附性和侵襲能力?我們用去甲基化藥物5-氮雜胞苷(5-Aza-cytidine)探討其對乳腺癌細胞株MDA-MB-435和胰腺癌細胞株BxPc-3抑癌基因E-cadherin(上皮鈣粘附素)表達的影響,檢測其對腫瘤細胞的生長抑制和降低腫瘤
4、細胞對細胞外基質(zhì)的粘附性和侵襲力.方法應用甲基化特異性PCR檢測兩種細胞株在用去甲基化藥物治療前、后E-cad基因5'-CpG島甲基化情況;用免疫組化(S-P法)檢測E-cad蛋白重新表達;半定量RT-PCR了解E-cad的mRNA改變;MTT比色法了解細胞的生長抑制情況;用Transwell體外侵襲實驗來檢測該藥抑制腫瘤細胞的侵襲性和降低腫瘤細胞對細胞外基質(zhì)的粘附性.結(jié)論去甲基化藥物能有效地逆轉(zhuǎn)乳腺癌細胞株MDA-MB-435的E-c
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