植物乳桿菌BS22對日糧添加AFB1肉雞消化道菌群的影響.pdf

1、本論文通過在日糧中添加植物乳桿菌BS22(BS22)和黃曲霉毒素B1(Aflatoxin B1，AFB1)飼喂肉雞，研究AFB1對肉雞消化道菌群的影響，同時(shí)探究植物乳桿菌BS22對AFB1肉雞消化道菌群的改善作用。試驗(yàn)選用1日齡，健康艾維茵肉雞120羽，公母隨機(jī)，分為3個(gè)組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10羽。分別為:空白組Ⅰ（基礎(chǔ)日糧）、AFB1組Ⅱ（基礎(chǔ)日糧+50μg/kg AFB1）和解毒組Ⅲ（基礎(chǔ)日糧+50μg/kg AFB1+1％植

2、物乳酸桿菌BS22），試驗(yàn)期為28d。在28日齡時(shí)，采集消化道嗉囊、腺胃、十二指腸、空腸、回腸及盲腸內(nèi)容物和黏膜樣品，通過PCR-DGGE、克隆測序、平板活菌計(jì)數(shù)和Real-time PCR方法檢測消化道內(nèi)容物和黏膜菌群。試驗(yàn)結(jié)果如下:
　　1.PCR-DGGE: DGGE結(jié)果顯示消化道除回腸內(nèi)容物外其他部位解毒組Ⅲ的細(xì)菌條帶數(shù)高于AFB1組Ⅱ和空白組Ⅰ。聚類圖顯示除腺胃和盲腸其他部位均是AFB1組Ⅱ與空白組Ⅰ聚在一起，而解毒組Ⅲ

3、單獨(dú)存在。除空腸和盲腸黏膜外，其他部位細(xì)菌條帶數(shù)AFB1組Ⅱ均高于解毒組Ⅲ和空白組Ⅰ，且解毒組Ⅲ和空白組Ⅰ的條帶數(shù)相近或相同。除回腸和盲腸，其他部位解毒組Ⅲ和空白組Ⅰ聚在一起，而AFB1組Ⅱ單獨(dú)存在。
　　2.克隆測序:DGGE圖譜上割膠回收條帶，克隆，測序，比對，得到的優(yōu)勢菌群為卷曲乳桿菌、唾液乳桿菌和嗜酸乳桿菌等;得到的特異性條帶大多為未培養(yǎng)的微生物。
　　3.活菌計(jì)數(shù):在嗉囊內(nèi)容物中，解毒組大腸埃希桿菌數(shù)量顯著低于空白

4、組、AFB1組組。腺胃內(nèi)容物中解毒組腸球菌和大腸埃希菌數(shù)量均是極顯著低于空白組和AFB1組。十二指腸、空腸和盲腸內(nèi)容物菌群各組間的同一種菌群數(shù)量差異均不顯著，除盲腸外其他部位解毒組乳酸桿菌數(shù)量均高于空白組和AFB1組，而腸球菌和大腸埃希桿菌數(shù)量除空腸外，其他部位均是空白組和AFB1組高于解毒組。在腺胃黏膜中，AFB1組的腸球菌數(shù)量極顯著高于空白組和解毒組，AFB1組大腸埃希桿菌數(shù)量極顯著高于空白組，并顯著高于解毒組。在十二指腸，空白組乳

5、酸桿菌數(shù)量顯著高于AFB1組，AFB1組大腸埃希菌數(shù)量顯著高于空白組和解毒組。在空腸黏膜AFB1組腸球菌數(shù)量極顯著高于空白組。在回腸，空白組乳酸桿菌數(shù)量極顯著高于攻毒組。嗉囊、盲腸2個(gè)部位同一種菌群含量空白組、AFB1組及解毒組3個(gè)組間差異不顯著。
　　4.Real-time PCR:在嗉囊內(nèi)容物中，空白組和AFB1組腸桿菌科均極顯著高于解毒組。在腺胃，解毒組乳酸桿菌屬數(shù)量極顯著高于空白組和AFB1組，空白組腸球菌屬含量顯著高于解

6、毒組，AFB1組腸桿菌科含量顯著高于解毒組。在回腸空白組腸桿菌科極顯著高于AFB1組和解毒組。整體內(nèi)容物乳酸桿菌屬和腸球菌屬的含量AFB1組與空白組間無顯著差異，解毒組乳酸桿菌屬數(shù)量相對空白組和AFB1組有增多的趨勢，而腸桿菌科數(shù)量解毒組相對空白組、AFB1組有減少的趨勢。在腺胃黏膜中，AFB1組腸球菌屬和腸桿菌科的數(shù)量均是極顯著高于空白組和解毒組。十二指腸黏膜空白組乳酸桿菌屬數(shù)量極顯著高于AFB1組，并顯著高于解毒組，AFB1組腸桿菌