七氟烷后處理對大鼠離體心臟缺血再灌注損傷心功能和ERK表達的影響.pdf

1、目的: 研究七氟烷后處理對細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal-regulatedprotein kinase，ERK1/2)活性的影響，探討其對大鼠離體心臟缺血再灌注保護作用的可能機制。 方法: 應(yīng)用Langendorff離體心臟灌注模型，實驗分兩部分。 實驗: 1.評估七氟烷后處理的心肌保護作用：84只SD大鼠隨機分為7組(n=12)：假手術(shù)組(Sham)，缺血再灌注組(Control

2、)，后處理組(Post，Sevo，DMSO，PD98059，Sevo+PD)。Sham組持續(xù)灌注150min：Control組平衡灌注30min，缺血30min，再灌注90min；Post組在再灌注即刻進行4個循環(huán)復(fù)灌25s/缺血25s，然后再灌注至150min；Sevo組復(fù)灌時給予含1.5MAC(3.0vol％)飽和七氟烷的K-H液灌注5min，沖洗10min，再灌注至150min；DMSO和PD98059組復(fù)灌時分別給予含DMSO(

3、<0.2％)、PD98059(20μmol/L)的K-H液灌注15min，Sevo+PD組復(fù)灌時七氟烷后處理的同時給予15min的PD98059(20μmol/L)。紀錄平衡灌注末，再灌注30min，60min，90min心功能指標，灌注結(jié)束時，TTC法計算心肌梗死面積百分比，電子顯微鏡觀察線粒體的損傷程度，Western blot半定量測定線粒體和胞質(zhì)細胞色素C的表達水平實驗 2.p-ERK活性的測定：35只SD大鼠，組別同上

4、(n=35)，各組復(fù)灌15min時，取下心臟迅速液氮凍存。Western blot法半定量測定心室胞質(zhì)磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)及其下游磷酸化p70S6K(p-p70S6K)的表達水平。 結(jié)果: 平衡灌注術(shù)各組間心功能指標(基礎(chǔ)值)差異未見統(tǒng)計學意義(P>0.05)；與Control組比較，Sevo組和Post組可改善缺血再灌注心臟的各項心功能指標和減少心肌梗死面積(P<0.05)：電子顯微鏡觀察線粒體形態(tài)，Sevo

5、組和Post組的損傷程度比Contml組明顯減輕；Western blot分析，與Control組比，Sevo組和Post組胞質(zhì)細胞色素C的含量明顯減少(P<0.05)，同時伴隨線粒體細胞色素C的含量明顯增多(P<0.05)。復(fù)灌15min時，Sevo組和Post組p-ERK1/2、p-p70S6K的表達比Control組顯著升高(P<0.05)：PD98059完全拮抗了七氟烷誘導(dǎo)的p-ERK1/2的表達同時抵消了其心肌保護效果。