脂肪乳逆轉(zhuǎn)布比卡因心臟毒性的作用研究.pdf

1、布比卡因是臨床上常用的脂溶性酰胺類長效局麻藥,在臨床上廣泛用于外周神經(jīng)阻滯、硬脊膜外阻滯和蛛網(wǎng)膜下腔阻滯,如果誤入靜脈或劑量過大,則可導(dǎo)致嚴(yán)重的心血管毒性反應(yīng)。由于缺乏特異性的拮抗藥物,臨床處理以對癥治療為主要方法,近幾年來,無論從動物實驗還是臨床個案報道都顯示脂肪乳在救治局麻藥心臟毒性時效果確切,尤其是對脂溶性藥物布比卡因的解毒效果甚為明顯。腎上腺素作為心肺復(fù)蘇時的一線用藥,也被認(rèn)為是在救治布比卡因心臟毒性時的有效藥物。然而,在救治布

2、比卡因心臟毒性時腎上腺素的效果是否優(yōu)于脂肪乳還需實驗進(jìn)行說明?；诖宋覀兪紫仍O(shè)計實驗觀察脂肪乳在逆轉(zhuǎn)布比卡因心臟毒性時其效果是否優(yōu)于脂肪乳聯(lián)合腎上腺素的作用。由于目前對脂肪乳救治布比卡因心臟毒性機制不清,為其能安全廣泛地應(yīng)用于臨床上,我們有必要研究清楚其作用機制。實驗二擬以H9C2心肌細(xì)胞為研究對象,觀察脂肪乳對布比卡因作用的H9C2心肌細(xì)胞凋亡的影響,從脂肪乳抑制心肌細(xì)胞凋亡角度初探其逆轉(zhuǎn)布比卡因心臟毒性的作用機制。
　　實驗一

3、:評價脂肪乳在逆轉(zhuǎn)布比卡因心臟毒性時的療效
　　目的:觀察脂肪乳(lipid emulsion,LE)以及LE聯(lián)合腎上腺素(Epinephrine,EPI)在救治布比卡因(Bupivacaine,BPV)所致家犬心臟毒性時的療效。
　　方法:健康成年家犬21只,分為3組,每組7只:生理鹽水(Saline)組(A組),20％LE組(B組),20%LE+EPI(C組)。0.75%布比卡因10mg·Kg-1經(jīng)股靜脈勻速推注,待MA

4、P降至基礎(chǔ)值的50%及ECG出現(xiàn)寬大畸形QRS波時行心肺復(fù)蘇(CPR),同時分別給予A組生理鹽水4ml/kg,B組20%LE4ml/kg,C組20%LE4ml/kg+EPI10μg/kg。持續(xù)監(jiān)測血壓及心率,記錄不同時間點自主循環(huán)恢復(fù)(ROSC)的家犬?dāng)?shù)量及MAP、HR、心電圖PR間期、QRS間期及QT間期的變化。
　　結(jié)果:在救治第10min時,B組ROSC數(shù)量略多于A組和C組,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義,在第15和第20min時明顯多

5、于A組和C組(P<0.05)。B組家犬在第20min時MAP明顯高于A組和C組(P<0.05或P<0.01),HR明顯快于A組和C組(P<0.05或P<0.01),PR間期、QRS間期、QT間期明顯短于A組和C組(P<0.05或P<0.01)。
　　結(jié)論:成功建立布比卡因心臟毒性的模型,20%脂肪乳救治能明顯提高家犬的生存率,且救治后的血流動力學(xué)指標(biāo)明顯優(yōu)于20%脂肪乳聯(lián)合腎上腺素10μg·Kg-1的效果。
　　實驗二:脂肪

6、乳對布比卡因致H9C2心肌細(xì)胞凋亡的影響
　　目的:觀察脂肪乳(Lipidemulsion,LE)對布比卡因(Bupivacaine,BPV)誘導(dǎo)的H9C2心肌細(xì)胞凋亡的影響。
　　方法:分組一:對照組、脂肪乳劑組(LE濃度分別為0.25%、0.5%、1%和2%)及布比卡因組(BPV濃度為0.38、0.54、0.77和1.54mM)培養(yǎng)24h后觀察H9C2的存活率(MTT法),得到LE誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞最佳增殖濃度以及BPV誘導(dǎo)

7、心肌細(xì)胞凋亡的半數(shù)抑制濃度。分組二:對照組、LE(1%)組、1.54mMBPV及LE(1%)聯(lián)合BPV濃度為1.54mM在不同時間點(6h、12h及24h)細(xì)胞的存活率,并通過Hoechst33258染色后在熒光顯微鏡下觀察其凋亡情況,最后用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞的凋亡程度。
　　結(jié)果:布比卡因不同濃度對大鼠H9C2心肌細(xì)胞均顯示出不同程度的細(xì)胞毒性作用,作用24h后1.54mM的BPV能使大多數(shù)細(xì)胞凋亡或死亡,而脂肪乳對H9C2心肌