姜黃素對(duì)阻斷NF-κB信號(hào)通路抑制人卵巢癌細(xì)胞株3AO增殖.pdf

1、研究目的:
　　1.姜黃素作用卵巢癌細(xì)胞株3AO后生長(zhǎng)情況。
　　2.初步研究姜黃素作用卵巢癌細(xì)胞株3AO后NF-κB家族蛋白表達(dá)的變化。
　　研究方法:
　　1.體外培養(yǎng)卵巢癌細(xì)胞株3AO。
　　2.采用MTT方法檢測(cè)對(duì)照組、不同濃度（20、40、80μg/L）Cur干預(yù)組（干預(yù)24、48小時(shí)）吸光值，計(jì)算細(xì)胞抑制率值。
　　3.應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)不同濃度（20、40、80μg/L）Cur干預(yù)24h

2、后細(xì)胞周期的改變。
　　4.應(yīng)用光學(xué)顯微鏡觀察不同濃度（20、40、80μg/L）Cur干預(yù)細(xì)胞24h后卵巢癌細(xì)胞形態(tài)改變。
　　5.利用Western blot方法檢測(cè)Cur（20、40、80μg/L）干預(yù)24小時(shí)后NF-κB、p-NF-κB在轉(zhuǎn)錄及翻譯水平的表達(dá)以及其抑制物IκB、p-IκB在翻譯水平的表達(dá)，與對(duì)照組進(jìn)行比較。
　　6.免疫熒光化學(xué)方法檢測(cè)Cur（20、40、80μg/L）干預(yù)3AO細(xì)胞24小時(shí)后N

3、F-κB表達(dá)。
　　7.RT-PCR技術(shù)檢測(cè)Cur（20、40、80μg/L）干預(yù)3AO細(xì)胞24小時(shí)后NF-κB mRNA的表達(dá)。
　　研究結(jié)果:
　　1.姜黃素對(duì)人卵巢癌細(xì)胞株3AO生長(zhǎng)的抑制作用，呈劑量時(shí)間依賴性。
　　2.流式細(xì)胞儀分析證實(shí)姜黃素能使3AO細(xì)胞周期阻滯于G0／G1期。
　　3.光學(xué)顯微鏡觀察顯示：隨著姜黃素濃度的增高，卵巢癌細(xì)胞株形態(tài)逐漸發(fā)生變化，透光性及折光性降低，細(xì)胞皺縮，細(xì)胞數(shù)量

4、減少，凋亡細(xì)胞增多。
　　4.Western blot結(jié)果顯示隨姜黃素作用濃度的增加，NF-κB、p-NF-κB蛋白表達(dá)水平明顯下降，IκB、p-IκB蛋白表達(dá)有增加。
　　5.免疫熒光結(jié)果顯示隨著姜黃素濃度的增高，細(xì)胞內(nèi)NF-κB表達(dá)逐漸減少。
　　6.RT-PCR結(jié)果顯示不同濃度姜黃素培養(yǎng)的卵巢癌細(xì)胞，隨著藥物濃度增高，NF-κB mRNA表達(dá)逐漸減弱，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　研究結(jié)論:
　　姜黃素能對(duì)