涼血化瘀方對實驗性肝衰竭及肝細胞凋亡作用的研究.pdf

1、目的：基于急性肝衰竭的病因病機，確立涼血化瘀大法及組方，通過藥效研究探討涼血化瘀方對急性肝衰竭模型的保護作用及抑制細胞凋亡的作用，并通過基因芯片技術闡明其抑制細胞凋亡的分子機制。
　　 理論研究：通過對祖國醫(yī)學關于黃疸的文獻分析，在肝臟生理病理特點以及對“急黃”文獻探源和疾病認識的基礎上明確急性肝衰竭的病因為濕熱疫毒，基本病機為瘀熱互結，并確立了涼血化瘀為主的治療大法。涼血化瘀法是針對急性肝衰竭瘀熱相搏的病理特點而確立，在此基礎

2、上組建了涼血化瘀方，具有清熱解毒，活血化瘀，涼血養(yǎng)陰等作用。涼血化瘀方遵循中醫(yī)辨證施治的原則組方配伍，繼承了中醫(yī)藥的特點，并提出新的治法、方藥，具有科學性、創(chuàng)新性。
　　 實驗研究：首先通過小鼠急性肝衰竭模型利用正交設計優(yōu)選了涼血化瘀方組成，優(yōu)選出大黃、生地和赤芍組成涼血化瘀方；進一步通過急性肝衰竭大鼠模型探討涼血化瘀方防治急性肝損傷大鼠肝功能、凝血功能、病理損傷的影響，分別通過TUNEL半定量檢測和流式細胞儀檢測組方對肝細胞凋

3、亡的影響；利用基因芯片技術研究組方對FHF大鼠細胞凋亡基因表達的影響，探討其分子機制；最后通過小鼠急性毒性實驗研究涼血化瘀方的毒性作用。
　　 結果：表明涼血化瘀方對急性肝損傷大鼠具有明顯的肝保護作用，可降低轉氨酶、膽紅素水平，改善凝血功能，減輕肝組織病理損傷，并且可調節(jié)細胞周期阻滯，從而抑制肝損傷大鼠肝細胞的凋亡，其機制可能是通過修復細胞周期S期的DNA復制損傷，從而抑制肝細胞凋亡；大鼠細胞凋亡基因芯片篩選發(fā)現(xiàn)涼血化瘀方能夠通

4、過基因調控達到抑制肝細胞凋亡的目的，其機制可通過調節(jié)多個細胞凋亡途徑實現(xiàn)，主要是通過下調凋亡誘導相關基因的表達，同時也少量上調凋亡抑制基因的表達。急性毒性實驗未測出藥物LD50，進行最大給藥量測定小鼠口服最大給藥量為人用量的141.75倍，無明顯不良反應，故認為該藥臨床口服用荮相當安全。
　　 通過理論研究和實驗研究闡明了涼血化瘀方立法組方的合理性，驗證了其對急性肝衰竭具有確切的防治作用，并闡明了其防治急性肝衰竭作用分子機制的科