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1、本論文使用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠蘿蛋白酶對(duì)市售牛奶進(jìn)行水解,通過(guò)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化,并用牛奶過(guò)敏者血清測(cè)定其水解效果。研究表明,胰蛋白酶的最適水解條件為溫度在40℃,pH8.0,酶與底物質(zhì)量比為5%,水解時(shí)間為3小時(shí),木瓜蛋白酶的水解最佳條件為65℃,pH6.5,酶與底物質(zhì)量比為4%,水解時(shí)間為3小時(shí),菠蘿蛋白酶的最佳水解條件為60℃,pH6.5,酶與底物質(zhì)量比為4%,水解時(shí)間為2小時(shí)。在酶的最佳水解條件下,用三種酶依次對(duì)牛奶進(jìn)行水解,水解
2、后的奶液對(duì)牛奶過(guò)敏者血清特異性IgE的抗原性最小,在可測(cè)定的范圍內(nèi),幾乎已經(jīng)不表現(xiàn)出抗原性。經(jīng)分析表明,牛奶中的幾種主要的過(guò)敏原表位存在著上述實(shí)驗(yàn)用酶的識(shí)別位點(diǎn),用蛋白酶水解時(shí),酶分子對(duì)過(guò)敏原的表位進(jìn)行攻擊,破壞過(guò)敏原表位的結(jié)構(gòu),從而消弱或消除了牛奶蛋白的過(guò)敏原性。 本實(shí)驗(yàn)利用建立的過(guò)敏性動(dòng)物模型的血清,作為參照血清,對(duì)實(shí)驗(yàn)所用的過(guò)敏者血清的特異性進(jìn)行了驗(yàn)證。結(jié)果表明,此例牛奶過(guò)敏者血清中的抗體,對(duì)牛奶中過(guò)敏原蛋白是特異性的,并
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