順鉑耐藥卵巢癌細(xì)胞化療藥物敏感性及P型銅轉(zhuǎn)運ATP酶、P-糖蛋白表達(dá)的研究.pdf

1、目的：研究順鉑(DDP)、洛鉑(LBP)、紫杉醇(PTX)、吉西他濱(GEM)對卵巢癌SKOV3細(xì)胞及順鉑耐藥SKOV3/DDP細(xì)胞增殖的影響，同時檢測P型銅轉(zhuǎn)運ATP酶(Copper-transporting P-type adenosine triphosphatese，ATP7B)、P-糖蛋白(P-glycoprotein，P-gp)在兩種細(xì)胞中的表達(dá)，評估其在卵巢癌耐藥預(yù)測中的作用。 方法：在相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)的變

2、化：用MTT法測定單藥應(yīng)用、雙藥聯(lián)合使用對兩種細(xì)胞生長的影響：流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞周期和凋亡率的變化；用免疫細(xì)胞化學(xué)染色法、流式細(xì)胞術(shù)檢測ATP7B、P-gp在兩種細(xì)胞株中的表達(dá)。 結(jié)果：(1)相同濃度的洛鉑、吉西他濱、紫杉醇分別作用于SKOV3細(xì)胞和SKOV3/DDP細(xì)胞相同時間后，細(xì)胞增殖抑制率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。(2)吉西他濱+洛鉑、紫杉醇+洛鉑、吉西他濱+紫杉醇、紫杉醇+順鉑、吉西他濱+順鉑兩藥聯(lián)合組與相應(yīng)單

3、一用藥組相比，能顯著抑制兩種細(xì)胞的生長，其中吉西他濱+洛鉑抑制率最高，紫杉醇+洛鉑組次之。(3)相同濃度順鉑作用48h后，兩種細(xì)胞凋亡率不同，SKOV3細(xì)胞凋亡率高，兩組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；相同濃度洛鉑、紫杉醇、吉西他濱分別作用于兩種細(xì)胞48h后，細(xì)胞凋亡率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。(4)順鉑、洛鉑主要作用于細(xì)胞G0/G1期；紫杉醇作用于細(xì)胞G2/M期；吉西他濱主要作用于S期。(5)AYP7B在SKOV3、SK

4、OV3/DDP細(xì)胞中表達(dá)分別為1.57±0.47，20.96±1.91，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)，P-gp在兩種細(xì)胞中的表達(dá)分別為1.22±0.15，2.39±1.27，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.309)。 結(jié)論：(1)SKOV3/DDP細(xì)胞對紫杉醇、洛鉑、吉西他濱無交叉耐藥。(2)順鉑、洛鉑與紫杉醇、吉西他濱主要作用于不同的細(xì)胞周期。(3)吉西他濱+洛鉑、紫杉醇+洛鉑、吉西他濱+紫杉醇兩藥聯(lián)合有高效協(xié)同抑制兩種細(xì)胞生