CD62P和CD44在兒童IgA腎病中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、研究目的： 1.檢測IgAN患兒外周血CD62P和CD44的水平及腎組織中CD62P和CD44的表達(dá)，探討CD62P和CD44在兒童IgAN發(fā)生中的作用及臨床意義。 2.研究IgAN患兒腎組織CD62P和CD44表達(dá)與腎小管間質(zhì)損害之間的關(guān)系，探討CD62P和CD44在IgAN患兒腎小管間質(zhì)損害中的作用。 材料和方法： 1.CD62P和CD44在IgAN患兒外周血中的水平 1.1臨床資料2005年

2、3月～8月在中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院兒童腎病中心住院的活動期IgAN患兒32例。所有病例均經(jīng)腎活檢(光鏡、免疫熒光、電鏡)證實(shí)為IgAN，并排除繼發(fā)性IgAN。其中男27例，女5例，年齡4歲5個月～13歲8個月，中位年齡9歲7個月。起病到確診IgAN病程0.7月～80.0月，中位病程3.0月。同期本院健康體檢兒童15例設(shè)為對照組，年齡、性別與病例組相匹配。 參照2001年中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會腎臟病學(xué)組制定的標(biāo)準(zhǔn)，將病例組IgAN患兒

3、按臨床表現(xiàn)分為三組：孤立性血尿組13例；血尿蛋白尿組9例；腎病綜合征組10例。按1982年WHO病理分級標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級，將不同病理分級IgAN患兒合并后分為三組：病理Ⅰ+Ⅱ級組13例；病理Ⅲ級組10例；病理Ⅳ級組9例。 1.2研究方法1.2.1血漿CD62P水平的檢測：采用雙抗體夾心、固相免疫放射法(RIA)。 1.2.2血清CD44水平的檢測：采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。 1.2.3其他檢測項(xiàng)目(1)24小

4、時尿蛋白定量：用磺基水楊酸法檢測。 (2)血清生化指標(biāo)：血清白蛋白(ALB)、膽固醇(CHOL)、尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)，用7170A全自動生化分析儀檢測。 (3)尿N-乙酰-氨基葡萄糖苷酶(NAG)：用PNP顯色法；尿β2微球蛋白(β2-MG)：用同位素放免法；尿溶菌酶(Lys)：用平板瓊脂法。 (4)血小板計數(shù)：用東亞KX-21多項(xiàng)目自動血球計數(shù)儀檢測。 1.3統(tǒng)計學(xué)分析應(yīng)用SPSS10.0軟

5、件進(jìn)行分析。各組數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示；多組均數(shù)比較采用單因素方差分析(one-wayANOVA)，其中兩兩間均數(shù)比較采用最小顯著(LSD)法；相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2.CD62P和CD44在IgAN患兒腎組織中的表達(dá) 2.1臨床資料2004年1月～2005年9月在中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院兒童腎病中心住院，并經(jīng)腎活檢(光鏡、免疫熒光、電鏡)證實(shí)為IgAN的患兒共46例，均排除

6、繼發(fā)性IgAN。其中男37例，女9例。年齡4歲1個月～14歲2個月，中位年齡9歲。起病到確診IgAN病程0.5月～96月，中位病程4.0月。所有病例處于病情活動期。腎活檢正常對照組4例，為腎移植術(shù)前健康配型不合供腎組織1例及腎腫瘤切除術(shù)遠(yuǎn)離腫瘤組織的腎組織3例。 臨床分型標(biāo)準(zhǔn)同前，將病例組IgAN患兒按臨床表現(xiàn)分為三組：孤立性血尿組14例；血尿蛋白尿組17例；腎病綜合征組15例。病理分級標(biāo)準(zhǔn)同前，將不同病理分級IgAN患兒合并后

7、分為三組：病理Ⅰ+Ⅱ級組23例；Ⅲ級組14例；Ⅳ級組9例。 2.2研究方法2.2.1腎組織CD62P的表達(dá)采用免疫組化SP法(Streptavidin-peroxidasebiotin)。操作按試劑盒說明。根據(jù)腎組織中染色陽性細(xì)胞占該類細(xì)胞的比例進(jìn)行雙盲打分(半定量分析法)：陰性(-)：陽性染色細(xì)胞＜5％；陽性(+)：陽性細(xì)胞＜25％；(++)：陽性細(xì)胞約25％～50％；(+++)：陽性細(xì)胞＞50％。 2.2.2腎組織C

8、D44的表達(dá)采用免疫組化SP法檢測。操作按試劑盒說明。判斷表達(dá)強(qiáng)度的方法同2.2.1。2.2.3腎小管間質(zhì)病變的分度根據(jù)腎皮質(zhì)區(qū)的腎小管萎縮、間質(zhì)炎細(xì)胞浸潤和纖維化情況，將腎小管間質(zhì)病變程度分為：輕度損害(累及＜20％)；中度損害(累及20％～50％)；重度損害(累及＞50％)。 2.3統(tǒng)計學(xué)分析應(yīng)用SPSS10.0軟件進(jìn)行分析。三組患兒腎小球、腎小管和腎間質(zhì)CD62P和CD44表達(dá)強(qiáng)度的比較采用等級資料的秩和檢驗(yàn)；表達(dá)陽性率之

9、間的比較采用x2檢驗(yàn)；腎小管和腎間質(zhì)CD62P和CD44表達(dá)與腎小管間質(zhì)病變的相關(guān)性采用Spearman等級相關(guān)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論： 1.在正常腎組織中，CD62P僅在血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)，CD44僅表達(dá)于少數(shù)腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞。而在IgAN患兒腎組織中，CD62P在腎小管上皮細(xì)胞顯著表達(dá)，CD44在腎小球、腎小管和腎間質(zhì)均有表達(dá)。 2.IgAN患兒外周血和腎組織CD62P和CD44的表達(dá)均較

10、對照組明顯增高，不同臨床表現(xiàn)組中，腎病綜合征組最高，孤立性血尿組最低，且與IgAN患兒的病理分級密切相關(guān)，提示CD62P和CD44參與了兒童IgAN的發(fā)生，外周血CD62P和CD44水平可作為判斷IgAN嚴(yán)重程度的指標(biāo)。 3.IgAN患兒外周血CD62P和CD44水平與24小時尿蛋白定量、血CHOL呈正相關(guān)，與血ALB呈負(fù)相關(guān)，提示CD62P和CD44可能參與了IgAN忠兒蛋白尿的發(fā)生。 4.IgAN患兒外周血CD62P