綠色木霉產(chǎn)雙功能酶的結(jié)構(gòu)與功能研究.pdf

1、江南大學(xué)博士學(xué)位論文綠色木霉產(chǎn)雙功能酶的結(jié)構(gòu)與功能研究姓名：劉萍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：食品科學(xué)指導(dǎo)教師：夏文水20090601江南大學(xué)博：十：學(xué)位論文雙功能酶基因的體外重組酶作用兩底物的性質(zhì)相近但并不完全一致，作用殼聚糖的最適溫度和最適pH分別集中于5560。C和5052；而作用CMC則為5560℃和42，水解方式均為外切；與從綠色木霉中純化的CCBE基本保持一致，其中重組酶CC的性質(zhì)與純化CCBE的一致性最高。內(nèi)含子1的保留通過(guò)改變

2、重組酶部分CMC催化結(jié)構(gòu)域的正確折疊而抑制其CMC降解活力，但對(duì)其底物結(jié)合位點(diǎn)無(wú)影響；而對(duì)于殼聚糖酶活力，其使酶與殼聚糖結(jié)合能力下降，但對(duì)其催化域的構(gòu)象影響不大；內(nèi)含子2的保留改變了纖維素結(jié)合結(jié)構(gòu)域的正確構(gòu)象，從而完全失去CMCase活力，但不影響重組酶殼聚糖酶活力的催化結(jié)構(gòu)域和底物結(jié)合結(jié)構(gòu)域，而是使其催化域附近的底物進(jìn)入通道變小，從而使得大分子難以進(jìn)入。由此證實(shí)了：CCBE作用殼聚糖的催化結(jié)構(gòu)域和底物結(jié)合位點(diǎn)均位于CCBE的N端及序列