基質(zhì)金屬蛋白酶-2基因多態(tài)性與2型糖尿病視網(wǎng)膜病變的關(guān)聯(lián)性研究.pdf

1、目的：糖尿?。╠iabetes mellitus，DM）是廣泛存在于世界各地，以高血糖為主要標(biāo)志的內(nèi)分泌代謝性疾病，是嚴(yán)重威脅人類健康的主要慢性病之一。糖尿病視網(wǎng)膜病變（diabetic retinopathy，DR）是糖尿病最常見的微血管并發(fā)癥，是糖尿病患者致盲的重要原因之一。DR的發(fā)病機(jī)制目前還沒有完全闡明，一些研究表明DR是一種多因素協(xié)同作用的并發(fā)癥，身體長期處于高血糖的狀態(tài)，導(dǎo)致一系列的代謝異常與DR的發(fā)生有關(guān)，但是并不能完全由

2、生理生化和環(huán)境因素來解釋DR的發(fā)病時間和嚴(yán)重程度。有些患者DR與DM幾乎同時發(fā)病，而部分患者DR的發(fā)生卻在DM發(fā)病十幾年或幾十年后；同時有研究發(fā)現(xiàn)DR具有家族聚集傾向，不同種族和地域的糖尿病人群DR的發(fā)病率也不盡相同。綜上所述，遺傳因素在DR的發(fā)生、發(fā)展過程中起著很重要的作用。目前國內(nèi)外的學(xué)者主要從DR發(fā)生發(fā)展的分子生物學(xué)角度著手，篩選出可能有影響的候選因子，從基因多態(tài)性及基因表達(dá)調(diào)控方面分析這些因子在DR中的作用。故在此我們對基質(zhì)金屬

3、蛋白酶-2與2型糖尿病視網(wǎng)膜病變的關(guān)聯(lián)性進(jìn)行研究。
　　 基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinases，MMPs）是一個蛋白水解酶家族，幾乎能降解細(xì)胞外基質(zhì)（extracell matrix，ECM）和基底膜（basement membrane，BM）的所有成分，在許多生理和病理過程中發(fā)揮重要作用，存在于MMPs基因上的單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism，SNP）可

4、能影響其基因的轉(zhuǎn)錄水平和蛋白質(zhì)的表達(dá)，從而與一些疾病的發(fā)病有關(guān)。本研究旨在探討MMP-2基因啟動子區(qū)-1306C/T及-735C/T多態(tài)性與中國北方漢族人群2型糖尿視網(wǎng)膜病變的關(guān)系。
　　 方法：本研究采用病例-對照研究方法，病例來源于2006年3月至2008年2月在河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院眼科及內(nèi)分泌科住院、以及在石家莊市區(qū)進(jìn)行DR篩查時發(fā)現(xiàn)的糖尿病患者，其中患有糖尿病而無DR的患者（DM組）139例，糖尿病視網(wǎng)膜病患者（DR組）

5、151例，DR組中包括118例非增殖期糖尿病視網(wǎng)膜患者（NPDR組）、33例增殖期糖尿病視網(wǎng)膜病變患者（PDR組），所有病例均經(jīng)國際WHO糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)及國際糖尿病視網(wǎng)膜病變臨床分類標(biāo)準(zhǔn)確診。150例健康對照（Control組）為同期在河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院進(jìn)行健康體檢的無關(guān)個體。用一次性真空管采集外周靜脈血4 ml，采用蛋白酶K消化-飽和氯化鈉鹽析法提取外周血白細(xì)胞DNA。采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性（polymerase c

6、hain reaction-restriction fragment length polymorphism，PCR-RFLP）分析方法檢測MMP-2的基因型及等位基因分布頻率。數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析采用SPSS11.5版軟件包（SPSS Company Chicago，Illinois，USA）進(jìn)行，認(rèn)為P<0.05有統(tǒng)計學(xué)意義，卡方分割法認(rèn)為P<α'=0.0125有統(tǒng)計學(xué)意義。比較各位點基因型頻率的觀察值與預(yù)期值并進(jìn)行卡方檢驗，并對正常對照組

7、行Hardy-Weinberg平衡分析。連鎖不平衡分析采用2LD軟件（1.2 version，Rockefeller University，New York）進(jìn)行。病例組與對照組的基因型和等位基因頻率分布比較采用行×列表x2檢驗。以非條件Logistic回歸法計算相對風(fēng)險度的比值比（odds ratio，OR）及其95％可信區(qū)間（confidence interval，CI）。
　　 結(jié)果：
　　 1對照組MMP-2兩個

8、多態(tài)位點的基因型頻率分布符合Hardyr-wemberg平衡（P>0.05）。
　　 2 MMP-2基因啟動子區(qū)-1306C/T多態(tài)性與糖尿病視網(wǎng)膜病變的關(guān)系：Control、DM、DR三組C、T等位基因頻率分別為90.0％、10.0％；92.1％、7.9％；94.7％、5.3％，三組C和T等位基因頻率之間無顯著差異（x2=4.686，P=0.096）。三組C/C、C/T、T/T基因型頻率分別為80％、20％、0％；86.3％、

9、11.5％、2.2％；90.7％、7.9％、1.3％。三組之間有顯著差異（x2=7.130，P=0.028）?？ǚ椒指钸M(jìn)行兩兩比較的結(jié)果：Control組與DM組之間無顯著差異（x2=2.054，P>0.0125）；DM組與DR組之間無顯著差異（x2=1.388，P>0.0125）；Control組與DR組之間有顯著差異（x2=6.939，P<0.0125）。與C/T+T/T基因型相比，C/C基因型可能會增加糖尿病視網(wǎng)膜病變的發(fā)病風(fēng)險。

10、Control組與DR組相比較經(jīng)校正的OR=2.446（95％CI=1.239-4.829）；DM組與DR組比較經(jīng)校正的OR=1.549（95％CI=0.745-3.223）。
　　 3 MMP-2基因啟動子區(qū)-735C/T多態(tài)性與糖尿病視網(wǎng)膜病變的關(guān)系：Control、DM、DR三組C、T等位基因頻率分別為84.0％、16.0％；84.9％、15.1％；80.1％、19.9％。三組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（x2=2.671，P=0

11、.263>0.05）。三組C/C、C/T、T/T基因型頻率分別為70.7％、26.7％、2.7％；71.9％、25.9％、2.2％；63.6％、33.1％、3.3％。三組相比差異也無統(tǒng)計學(xué)意義（x2=2.789，P=0.248）。與C/T+T/T基因型，C/C基因型不增加糖尿病視網(wǎng)膜患者的發(fā)病風(fēng)險，Control與DR組相比經(jīng)校正的OR=0.725（95％CI=0.447-1.175）；DM與DR組相比經(jīng)校正的OR=0.681（95％C

12、I=0.414-1.119）。
　　 4以國際糖尿病視網(wǎng)膜病變分型作為分層標(biāo)準(zhǔn)：NPDR組MMP-2-1306C/T位點C/C、C/T、 T/T等位基因型頻率分別為90.7％、7.6％、1.7％，與PDR組（90.9％、9.1％、0％）之間無顯著差異（x2=0.002，P=0.968）。攜帶C/C基因型的個體不比攜帶C/T+T/T基因型的個體發(fā)生PDR的風(fēng)險高，經(jīng)校正的OR=1.028（95％CI=0.269-3.923）。兩組

13、C、T等位基因頻率分別為94.5％、5.5％；95.5％、4.5％，兩組之間無顯著差異（x2=0.095，P=0.758）。同樣NPDR組MMP-2-735C/T位點C/C、C/T、T/T基因型頻率分別為62.7％、33.9％、3.4％，與PDR組（66.7％，30.3％，13.0％）相比無顯著差異（x2=0.174，P=0.676）。攜帶C/C基因型的個體不比攜帶C/T+T/T基因型的個體發(fā)生增殖性視網(wǎng)膜病變的風(fēng)險高，經(jīng)校正的OR值為

14、1.189（95％CI=0.527-2.685）。兩組C、T等位基因頻率分別為79.7％、20.3％；81.8％、18.2％，相比差異也無統(tǒng)計學(xué)意義（x2=0.150，P=0.698）。
　　 結(jié)論：
　　 1在中國北方漢族人群中MMP-2基因啟動子區(qū)-1306C/T多態(tài)性可能與2型糖尿病視網(wǎng)膜病變的發(fā)病風(fēng)險有關(guān)。與C/T+T/T基因型相比，攜帶C/C基因型可能增加糖尿病視網(wǎng)膜病變的發(fā)病風(fēng)險，糖尿病患者中攜帶C/C基因型