基質(zhì)金屬蛋白酶在增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變增殖膜中的表達研究.pdf

1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文基質(zhì)金屬蛋白酶在增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變增殖膜中的表達研究姓名：劉東寧申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：劉哲麗20040401連續(xù)切片5 張。所有切片先作H E 染色，結(jié)構(gòu)完整的增殖膜行免疫組織化學(xué)染色。二、M M P 一2 、M M P 一9 檢測免疫組織化學(xué)染色采用福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司提供的試劑盒，按照試劑盒說明書步驟進行染色。實驗以死后1 2 小時內(nèi)，角膜移植取材后的正常成年人尸體眼球的視網(wǎng)膜組織為

2、陰性對照組，以P B S 代替特異性第一抗體為自身空白對照。在光鏡下觀察免疫組化染色切片，M M P - 2 、M M P 一9 以背景清晰、細胞胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，計算陽性率，反映M M P 一2 、M M P 一9 在視網(wǎng)膜增殖膜的定性表達；每張切片在高倍顯微鏡下( 4 0 0倍) 隨機選擇5 個視野，采用M e t a m o r p h ／D P l 0 ／B X 5 1 圖像分析軟件，測量其平均灰度值，反映M M P 一

3、2 、M M P 一9 在視網(wǎng)膜增殖膜的半定量表達。對M M P 一2 、M M P 一9 的定性表達和定量表達結(jié)果分別采用X 2 檢驗和t 檢驗進行統(tǒng)計學(xué)分析。結(jié) 果一、病理組織切片觀察P D R 的視網(wǎng)膜增殖膜中可見新生血管，多位于增殖膜周邊部。部分新生血管管腔內(nèi)可見紅細胞和分葉核細胞。增殖膜內(nèi)還可見到膠原纖維等細胞外基質(zhì)和不同形態(tài)的細胞，根據(jù)細胞形態(tài)，可見成纖維樣細胞、色素上皮細胞及神經(jīng)膠質(zhì)細胞。P v R 的視網(wǎng)膜增殖膜中亦可見

4、數(shù)量不等的色素上皮細胞、成纖維細胞樣細胞、神經(jīng)膠質(zhì)細胞和巨噬細胞，還可見膠原纖維等細胞外基質(zhì)。正常視網(wǎng)膜細胞排列整齊，各層結(jié)構(gòu)清晰完整。二、定性觀察M M P 一2 、M M P 一9 棕黃色陽性表達多數(shù)存在于細胞胞漿和細胞外基質(zhì)，陽性細胞呈散在的或聚集分布。P D R 增殖膜和P V R 增殖膜M M P 一2 、M M P 一9 表達陽性細胞主要為色素上皮細胞和成纖維樣細胞。P D R 增殖膜還可見到血管內(nèi)皮細胞及其周圍基質(zhì)M M

5、P 一9 染色陽性。P D R 增殖膜染色陽性率分別是M M P 一2 為6 7 ％，M M P 一9 為8 3 ％。P v R 增殖膜染色陽性率分別是M M P - 2 為7 2 ％，M M P 一9 為6 1 ％。正常視網(wǎng)膜標本M M P 一2 、M M P 一9 染色陰性。P D R 增殖膜M M P 一2 、M M P 一9 陽性表達率與P v R 增殖膜相比，差別無統(tǒng)計學(xué)意義( P > O ．0 5 ) 。·2