血漿硒濃度和硒蛋白P基因多態(tài)性與2型糖尿病的關(guān)聯(lián)性研究.pdf

1、2型糖尿?。═ype2Diabetes mellitus，T2DM）是一種嚴(yán)重危害人類健康的內(nèi)分泌代謝疾病。其中，空腹血糖受損（impaired fasting glucose，IFG）和糖耐量受損（impaired glucose tolerance，IGT）是正常糖耐量到T2DM的中間代謝階段。隨著人們生活水平的提高、膳食模式的改變、人口老齡化以及肥胖發(fā)生率的增加，T2DM的患病率呈現(xiàn)逐年增高趨勢(shì)，據(jù)世界衛(wèi)生組織估計(jì)，到2030年全

2、球?qū)⒂?.66億人患有糖尿病，且會(huì)有大量IFG/IGT的流行。氧化應(yīng)激和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在糖尿病的發(fā)生中起到重要的作用。
　　硒是人體內(nèi)重要的必需微量元素之一，它的主要功能由25種硒蛋白發(fā)揮，其中一些具有抗氧化以及調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的功能。因此，硒元素可能通過這兩種途徑來影響T2DM的發(fā)生。然而研究硒與T2DM關(guān)聯(lián)的動(dòng)物以及人群流行病學(xué)的結(jié)果均存在較大差異。在25種硒蛋白中，硒蛋白P（selenoprotein P，SEPP）的主要作用是將

3、肝臟產(chǎn)生的硒運(yùn)送到身體各部分。位于SEPP基因3’非翻譯區(qū)的單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)（Single Nucleotide Polymorphism，SNP）rs7579可以影響該蛋白全長亞型的表達(dá)，全長亞型有更強(qiáng)的運(yùn)輸硒的能力，從而影響有代表性的硒的生物標(biāo)志物的濃度和活性，進(jìn)而影響疾病的患病情況。
　　因此，本研究的目的是探究血漿硒水平、SEPP rs7579基因多態(tài)性以及兩者交互作用與T2DM的關(guān)聯(lián)。主要研究內(nèi)容如下：
　　第一

4、部分 血漿硒濃度與2型糖尿病的關(guān)聯(lián)性研究
　　第一節(jié) 血漿硒濃度與2型糖尿病的關(guān)聯(lián)性研究
　　目的：研究血漿硒濃度與T2DM的關(guān)聯(lián)關(guān)系。
　　方法：采用GOD-POD法測(cè)空腹血糖（Fasting blood glucose，F(xiàn)PG），采用電化學(xué)發(fā)光免疫分析方法（electrochemiluminescence immunoassay，ECLIA）測(cè)空腹胰島素（fasting plasma insulin，F(xiàn)PI），利用

5、穩(wěn)態(tài)模式（homeostasis model assessment，HOMA）評(píng)估法評(píng)估HOMA-IR和HOMA-β。采用電感耦合等離子體質(zhì)譜法（inductively coupled plasma mass spectrometry，ICP-MS）測(cè)量血漿硒濃度。
　　結(jié)果：本次研究總共檢測(cè)5392名受試者，T2DM患者2630例和正常糖耐量（normal glucose tolerance，NGT）受試者2762例。
　

6、?。?）T2DM組與NGT組相比，T2DM患者血漿HOMA-IR值是顯著增高的（T2DM4.26±0.13vs.NGT2.17±0.11；P<0.001），而HOMA-β值是顯著下降的（T2DM44.40±1.78vs.NGT103.37±5.01；P<0.001）。
　　（2）T2DM患者和NGT受試者的平均血漿硒濃度分別為98.01±25.37、96.72±21.05μg/L。經(jīng)多變量調(diào)整后兩邊的五分位數(shù)硒區(qū)間（＜79.62，

7、79.63-90.31，99.81-112.67，>112.68μg/L）相對(duì)于中間的五分位數(shù)硒區(qū)間（<90.32-99.80μg/L）T2DM患病風(fēng)險(xiǎn)的OR值分別為1.68（1.35，2.08），1.01（0.82，1.24），1.15（0.93，1.41）和1.86（1.51，2.29）。
　　（3）在五分位數(shù)硒濃度較低的三個(gè)分位，血漿硒濃度每升高5μg/L，T2DM的OR值為0.81(0.78-0.85)；在五分位數(shù)硒濃度較

8、高的三個(gè)分位，血漿硒濃度每升高5μg/L，T2DM的OR值為1.21(1.18-1.25)。
　　結(jié)論：微量元素硒與T2DM呈現(xiàn)出U型的關(guān)聯(lián)，硒水平過高或者過低都可能導(dǎo)致T2DM的風(fēng)險(xiǎn)的增加。
　　第二節(jié) 血漿硒蛋白P與T2DM的關(guān)聯(lián)性研究
　　目的：探尋血漿硒蛋白P（selenoprotein P，SEPP）濃度與T2DM的關(guān)聯(lián)性。方法：采用ELISA測(cè)定血漿SEPP濃度。
　　結(jié)果：本次研究總共檢測(cè)1293名

9、被試者，T2DM患者610例和NGT受試者683例。經(jīng)多變量調(diào)整后兩個(gè)較高的三分位數(shù)硒蛋白區(qū)間（4.8~5.96，>5.96mg/L）相對(duì)最低血漿硒蛋白濃度區(qū)間（<4.8mg/L）患T2DM的風(fēng)險(xiǎn)分別為0.83（0.66，1.10），1.31（1.00，1.68）。
　　結(jié)論：硒蛋白濃度過高或者過低都可能導(dǎo)致T2DM的患病風(fēng)險(xiǎn)增加。
　　第三節(jié) 氧化應(yīng)激與T2DM以及血漿硒濃度的相關(guān)性研究
　　目的：探究氧化應(yīng)激與T2

10、DM以及血漿硒濃度的相關(guān)性。
　　方法：采用硫代巴比妥酸（thiobarbituric acid，TBA）比色法檢測(cè)血漿丙二醛（malondialdehyde，MDA）。
　　結(jié)果：（1）T2DM組與NGT組相比，T2DM患者血漿MDA和（T2DM6.52±0.18nmol/L vs.NGT5.79±0.12nmol/L；P=0.001）。
　　（2）將（79.63-90.31，<90.32-99.80，99.81-1

11、12.67μg/L）歸類為一個(gè)區(qū)間79.62-112.67μg/L。79.62-112.67和>112.67μg/L血漿硒區(qū)間的MDA值顯著低于<79.62μg/L血漿硒區(qū)間（79.62-112.67μg/L5.81±3.24nmol/L vs.<79.62μg/L6.27±2.95nmol/L，P<0.001；>112.67μg/L5.89±2.93vs.<79.62μg/L6.27±2.95nmol/L,P=0.018）。
　

12、　結(jié)論：脂質(zhì)過氧化程度的增加與T2DM有很強(qiáng)的關(guān)聯(lián)性；血漿硒濃度降低可能與機(jī)體脂質(zhì)過氧化水平升高相關(guān)。
　　第二部分 硒蛋白P rs7579基因多態(tài)性與2型糖尿病風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)性
　　目的：探討SEPP rs7579基因多態(tài)性以及該SNP和血漿硒濃度的交互作用與T2DM的關(guān)聯(lián)性。
　　方法：使用TaqMan探針進(jìn)行基因分型；采用western blot檢測(cè)SEPP亞型的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：（1）總體來說，GG和GA

13、基因型攜帶者相對(duì)于AA基因型攜帶者T2DM的患病風(fēng)險(xiǎn)分別為0.90（0.65，1.24）和0.80（0.58，1.12）。將血漿硒濃度分為5分位后，在最低分位，GG和GA基因型攜帶者相對(duì)于AA基因型攜帶者T2DM的患病風(fēng)險(xiǎn)分別為0.49（0.24，0.98）和0.44（0.22，0.90）。
　　（2）在三個(gè)低的五分位數(shù)硒濃度，血漿硒濃度每增高5μg/L，GG，GA，AA基因型攜帶者T2DM的患病風(fēng)險(xiǎn)分別為0.94(0.90，0.