白介素8在兔腹主動(dòng)脈球囊擴(kuò)張術(shù)后血管炎性反應(yīng)中的作用.pdf

1、目的：隨著社會(huì)的進(jìn)步和人民生活水平的提高，冠心病已成為全球范圍內(nèi)威脅人類生命的首要致死性疾病。經(jīng)皮腔內(nèi)冠狀動(dòng)脈成形術(shù)(percutaneous transluminal coronary angioplasty,PTCA)作為治療冠心病的主要手段，在臨床上得到了越來越廣泛的應(yīng)用，然而介入治療術(shù)后再狹窄的發(fā)生在很大程度上影響了其遠(yuǎn)期效果。對(duì)于介入治療術(shù)后再狹窄機(jī)制的研究發(fā)現(xiàn)，血管內(nèi)皮細(xì)胞過度增生及血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)的增殖、遷移是

2、發(fā)生再狹窄的主要原因。研究表明,炎性反應(yīng)在血管再狹窄過程中起重要作用。闡明血管損傷后參與炎性反應(yīng)的各個(gè)炎性因子之間的關(guān)系與作用規(guī)律，對(duì)于血管性疾病的發(fā)病機(jī)制研究和血管成形術(shù)后主要并發(fā)癥的防治等方面均有重要的意義。本研究通過測(cè)定兔腹主動(dòng)脈球囊擴(kuò)張后各時(shí)間點(diǎn)白細(xì)胞介素8(Interleukin-8,IL-8)、白細(xì)胞介素6(Interleukin-6,IL-6)、腫瘤壞死因子 α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)

3、和 C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)水平變化情況，探討兔腹主動(dòng)脈球囊擴(kuò)張后炎性因子水平變化的規(guī)律，闡明其作用機(jī)制，并對(duì)干預(yù)血管再狹窄這一病理過程提供了新的角度，有必要進(jìn)行深入的研究。
　　 方法：選取9-14月齡新西蘭大白兔16只，全部為雄性動(dòng)物，體重2.50-3.25kg，實(shí)驗(yàn)前均適應(yīng)性飼養(yǎng)5-7d，均單籠、低脂飼料飼養(yǎng)，由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)后繼續(xù)單籠、低脂飼料喂養(yǎng)。以上動(dòng)物隨機(jī)分為實(shí)

4、驗(yàn)組(experiment group)和對(duì)照組(control group)，每組各 8只動(dòng)物。以 10g/L 戊巴比妥鈉 3.0-3.5ml/kg 耳緣靜脈注射麻醉實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，常規(guī)消毒鋪巾后，采用Seldinger技術(shù)穿刺股動(dòng)脈并留置鞘管，經(jīng)鞘管注入普通肝素200 單位抗凝，沿導(dǎo)引鋼絲逆行插入球囊，造影后將球囊定位，置于髂動(dòng)脈以上2個(gè)椎體處，以 405.30～607.95 kPa 壓力擴(kuò)張球囊，同時(shí)注射造影劑證實(shí)球囊完全擴(kuò)張堵閉腹主動(dòng)

5、脈，自近心端緩慢回拉(拉傷長(zhǎng)度3-4cm)，反復(fù)3次，每次擴(kuò)張時(shí)間20秒，間隔15秒，造成球囊擴(kuò)張拉傷兔腹主動(dòng)脈。對(duì)照組動(dòng)物術(shù)前準(zhǔn)備及麻醉方法同實(shí)驗(yàn)組，但只進(jìn)行股動(dòng)脈穿刺留置鞘管，不進(jìn)行球囊拉傷。分別于實(shí)驗(yàn)前，實(shí)驗(yàn)后4小時(shí)、1天、1周、2周、4周耳緣靜脈采血5ml，以3000r/min離心20min 后，取上清液得血清標(biāo)本，-80℃冰箱統(tǒng)一保存。4周后處死動(dòng)物前復(fù)查造影，進(jìn)行病理檢查觀察組織學(xué)變化。通過酶聯(lián)免疫雙抗體夾心法測(cè)定兔腹主動(dòng)脈

6、球囊擴(kuò)張后各時(shí)間點(diǎn)IL-8、IL-6、TNF-α和CRP水平變化情況，探討兔腹主動(dòng)脈球囊擴(kuò)張后炎性因子水平變化的規(guī)律，闡明其作用機(jī)制。所有數(shù)據(jù)輸入SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包，研究數(shù)據(jù)中計(jì)量資料以(±s)表示，兩組間比較使用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料使用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)資料采用相關(guān)分析法計(jì)算相關(guān)系數(shù)，以p<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：1.4周后造影檢查，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物腹主動(dòng)脈拉傷處出現(xiàn)明顯狹窄，而對(duì)照組動(dòng)物無明顯變化。病理檢查結(jié)

7、果：肉眼觀察對(duì)照組動(dòng)物動(dòng)脈柔軟、有彈性,顏色粉紅均勻,管腔內(nèi)膜較光滑。實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物腹主動(dòng)脈拉傷處外觀粗細(xì)不均勻,管壁明顯僵硬。取材后見管壁增厚,光鏡下形態(tài)學(xué)觀察：對(duì)照組兔腹主動(dòng)脈血管壁內(nèi)膜、中膜、外膜三層結(jié)構(gòu)明顯，內(nèi)膜完整、無增厚，內(nèi)皮下無脂質(zhì)沉積，中膜平滑肌細(xì)胞細(xì)長(zhǎng)呈梭形，細(xì)胞核藍(lán)染，同心圓狀排列整齊；實(shí)驗(yàn)組兔腹主動(dòng)脈管腔狹窄，內(nèi)膜明顯增厚，中膜平滑肌細(xì)胞排列紊亂，單位面積細(xì)胞核數(shù)量增多。
　　 2.兩組動(dòng)物之間一般情況分析：兩

8、組動(dòng)物月齡、術(shù)前體重、術(shù)后體重、穿刺徑路、術(shù)前后血脂水平(包括 TG,TC,LDL-C,HDL-C)等一般情況相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)，兩組動(dòng)物具有可比性。
　　 3.兩組動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前后IL-8等炎性因子水平變化情況：實(shí)驗(yàn)前兩組動(dòng)物IL-8、IL-6、TNF-α、CRP 等水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物球囊損傷后4小時(shí)IL-8水平即開始升高，與對(duì)照組以及術(shù)前水平比較有顯著性差異(p<0.01)，術(shù)后 1天達(dá)到

9、峰值水平，持續(xù)升高至第4周。IL-6、TNF-α、CRP水平于術(shù)后24小時(shí)開始升高，IL-6、CRP術(shù)后1周達(dá)到峰值水平，TNF-α術(shù)后2周達(dá)到峰值，與對(duì)照組以及術(shù)前水平比較有顯著性差異(p<0.01)。上述炎性因子持續(xù)增高4周，均明顯高于對(duì)照組(p<0.01)。對(duì)照組上述炎性因子無此變化趨勢(shì)。
　　 4.相關(guān)性分析：IL-8水平與 IL-6、TNF-α、CRP水平呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)r分別為0.769，0.673，0.897(p