氯化鑭對(duì)原代大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞毒性作用機(jī)制研究.pdf

1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文氯化鑭對(duì)原代大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞毒性作用機(jī)制研究姓名：魯帥申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：衛(wèi)生毒理學(xué)指導(dǎo)教師：蔡原20090401實(shí)驗(yàn)分組將LaCl3用無血清的DMEM配制，使終濃度分別為025，05，10，20mmol／L，對(duì)照組使用無血清DMEM。研究方法l、大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞的原代培養(yǎng)及其免疫細(xì)胞化學(xué)法鑒定2、MTT法測(cè)定氯化鑭對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖能力的影響3、熒光探針法測(cè)定氯化鑭對(duì)細(xì)胞內(nèi)【ca2]i的影響4、流式細(xì)胞儀法

2、測(cè)定氯化鑭對(duì)線粒體膜電位的影響5、化學(xué)比色法測(cè)定氯化鑭對(duì)線粒體和胞漿中細(xì)胞色素C含量的影響6、流式細(xì)胞儀法測(cè)定氯化鑭對(duì)細(xì)胞凋亡的影響7、流式細(xì)胞儀法測(cè)定氯化鑭對(duì)細(xì)胞周期的影響8、倒置顯微鏡下觀察星形膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化結(jié)果1、免疫細(xì)胞化學(xué)法鑒定星形膠質(zhì)細(xì)胞結(jié)果GFAP免疫組化完全后，鏡下可見絕大部分細(xì)胞胞漿被染成棕黃色，在倒置顯微鏡下每張玻片選擇10個(gè)視野，計(jì)數(shù)陽性細(xì)胞所占比例，陽性率可達(dá)90％以上，因此可將此原代培養(yǎng)的細(xì)胞作為星形膠質(zhì)細(xì)