骨保護(hù)素基因修飾的自體骨髓基質(zhì)細(xì)胞在Beagle犬牙周組織再生術(shù)中的作用.pdf

1、目的： 觀察骨保護(hù)素(OPG)基因修飾的骨髓基質(zhì)細(xì)胞(BMSCs)復(fù)合PLGA材料移植對(duì)牙周骨缺損的修復(fù)作用。 方法： (1)4只成年Beagle犬，選其24顆前牙頸部齦緣水平結(jié)扎絲線并飼以高糖飲食，分別于1w、2w、4W、8w檢查實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的牙周狀況，記錄結(jié)果。 (2)穿刺抽吸犬髂骨骨髓，貼壁篩選法獲取BMSCs，接種到PLGA材料上進(jìn)行體外培養(yǎng)，并利用脂質(zhì)體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染重組質(zhì)粒pSecTag2/B-OPG，

2、掃描電鏡觀察BMSCsopg-PLGA復(fù)合物。 (3)牙周病模型建成后行翻瓣檢查、修整近中牙槽骨缺損至3mm,共分3組：實(shí)驗(yàn)組(缺損處植入OPG基因修飾的BMSCs復(fù)合PLGA)；陰性對(duì)照組(缺損處植入BMSCs復(fù)合PLGA)；空白對(duì)照組(常規(guī)牙周翻瓣治療)。 (4)牙周手術(shù)后第6周處死動(dòng)物，進(jìn)行臨床、X線片觀察，并制作切片行組織學(xué)觀察，測(cè)量新生牙槽骨和牙骨質(zhì)的高度、新生結(jié)締組織的附著量。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析相關(guān)數(shù)據(jù)。 結(jié)

3、果： (1)所有實(shí)驗(yàn)用牙的牙周均形成近似人類臨床牙周病的實(shí)驗(yàn)性牙周病，但嚴(yán)重程度不一。(2)掃描電鏡顯示BMSCsopgc與PLGA支架復(fù)合良好。(3)牙周手術(shù)后6周，術(shù)區(qū)傷口愈合良好，粘膜無紅腫及感染。(4)X片觀測(cè)：實(shí)驗(yàn)組牙周組織缺損區(qū)牙槽骨高度高于兩對(duì)照組。(5)組織學(xué)觀察：實(shí)驗(yàn)組可見大部分的牙周組織再生，較對(duì)照組有更多的新生牙槽骨，可見新生骨小梁，接近正常骨組織結(jié)構(gòu)，支架材料已消失，未見根吸收等不良愈合方式。陰性對(duì)照組修

4、復(fù)了部分牙周組織缺損，可見少量牙槽骨，膠原纖維多見；空白對(duì)照組鮮見牙周組織修復(fù)，有纖維結(jié)締組織和長上皮細(xì)胞長入。實(shí)驗(yàn)組組織學(xué)評(píng)分與兩對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01，P<0.01)。 結(jié)論： (1)OPG基因修飾的BMSCs在PLGA支架中生長良好，牙周手術(shù)后動(dòng)物也無不良反應(yīng)，說明PLGA適用于牙周組織工程； (2)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明OPG基因治療與組織工程聯(lián)合能有效促進(jìn)犬牙周骨缺損的骨組織再生； (3)O