聯(lián)合重組纖維連接蛋白活化異基因殺傷細胞過繼治療腎癌的實驗研究.pdf

1、Y1414270博士學位論文聯(lián)合重組纖維連接蛋白活化異基因殺傷細胞過繼治療腎癌的實驗研究學校代碼：l∞23學號：zB2005015ResearchofadoptiVetraⅡsfbrringaUogenicRetroNectiⅡactiVatedldUerinrenalcancerinvitroandinvivo所院：姓名：指導教師：導師小組：學科專業(yè)：研究方向：完成日期：北京協(xié)和醫(yī)院田軍李漢忠教授馬建輝教授馬潔教授泌尿外科腎癌的過繼細

2、胞免疫治療2008年6月6日將取自2例腎癌患者的腎腫瘤進行腎癌原代細胞培養(yǎng)；采集健康志愿者和腎癌患者外周血分別培養(yǎng)RAK細胞，體外殺傷HLAA2陽性的腎透明細胞癌細胞系l地CLSL、RCCFTL以及2株腎癌原代細胞，乳酸脫氫酶法定量檢測黜～K細胞體外殺傷腎癌細胞的能力。結(jié)果①RAK培養(yǎng)第14天時細胞呈集落樣活化狀態(tài)，形成以細胞毒性T細胞(CD3CD8)為主(占67％)的細胞群；CD3CD25細胞明顯增多、CD25(IL一2受體)表達上調(diào)

3、：凡墩細胞的擴增倍數(shù)明顯高于CD3AK細胞，二者培養(yǎng)第14天時分別擴增423倍及50倍(po05)。②健康人與腎癌患者來源的I乙～K細胞培養(yǎng)第14天時，擴增倍數(shù)分別為47l倍及318倍，CD3CD8T細胞的比例分別為6668％及5545％，差異均有統(tǒng)計學意義(po05)；培養(yǎng)上清液中的IFNY及TNFQ濃度無顯著差異①分別為032及O40)。③高劑量和低劑量異基因融氣K治療組腫瘤平均體積的增長均低于IL2對照組和生理鹽水對照組；荷瘤35

4、天時高劑量AlloRAK治療組裸鼠平均瘤重(0333O263克)明顯低于低劑量Allo＆～K治療組(13540193克)、IL一2治療組(11130254克)及生理鹽水治療組(1100O560克)(p值分別為O040、0026及O048)，高劑量觸lom～K治療組的抑瘤率為697％；低劑量Allo黜～K治療組瘤重也低于IL2治療組及生理鹽水治療組，但差異未達到統(tǒng)計學顯著性(p值分別為O413及0253)；④燦loRAK對人腎透明細胞癌細

5、胞系IⅪCLSL、RCCFTL及2株腎癌原代細胞具有明顯的殺傷作用，效靶比為375：1、75：1及150：l時，殺傷腎癌細胞的比率分別為680％～7169％、1725％～7998％及2792％～8348％。結(jié)論聯(lián)合重組人纖維連接蛋白體外培養(yǎng)淋巴細胞能顯著提高細胞的擴增倍數(shù)，獲得大量的殺傷細胞；用健康人外周血培養(yǎng)的RAK細胞體外擴增倍數(shù)及效應細胞的比例均高于腎癌患者外周血培養(yǎng)的凡Ⅸ細胞；健康人來源的異基因m蛾細胞能在動物體內(nèi)起到抑制腎腫瘤