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1、目的:觀察神經(jīng)生長(zhǎng)因子(nerve growth factor,NGF)聯(lián)合順鉑(DDP)對(duì)肺腺癌細(xì)胞株A549凋亡的影響。 方法:將A549細(xì)胞置含10%胎牛血清的RPMI-1640養(yǎng)液(內(nèi)含青霉素100u/ml、鏈霉素100u/ml)中,在37℃、5%CO2、飽和濕度的恒溫箱中培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)隨機(jī)分為分四組:(1)對(duì)照組(A549細(xì)胞和RPMI-1640);(2)順鉑處理組(A549細(xì)胞、RPMI-1640和順鉑5ug/ml);(
2、3)NGF處理組(A549細(xì)胞,RPMI-1640和NGF 5、10、15ug/ml);(4)NGF+DDP處理組(A549細(xì)胞、RPMI-1640、NGF10ug/ml和DDP5ug/ml),培養(yǎng)48h后收集細(xì)胞,MTT法測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率,電鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。 結(jié)果:各組細(xì)胞培養(yǎng)48h后,MTT結(jié)果顯示NGF可以抑制細(xì)胞生長(zhǎng),抑制率隨著NGF濃度增加而增高,NGF、順鉑及NGF+DDP組細(xì)胞抑制率高
3、于對(duì)照組,NGF+DDP組細(xì)胞抑制率明顯高于其它各組,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。電鏡下NGF組、順鉑組、NGF+DDP組電鏡下可見細(xì)胞核固縮、破碎,染色質(zhì)濃集、邊聚形成新月體,凋亡小體形成。對(duì)照組細(xì)胞中細(xì)胞核及線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器結(jié)構(gòu)清晰,細(xì)胞核體的形態(tài)基本正常。NGF組、順鉑組、NGF+DDP組細(xì)胞凋亡率明顯高于對(duì)照組,NGF+DDP組細(xì)胞凋亡率高于NGF組和順鉑組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),NGF組(5ug/ml、
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