舒肝補(bǔ)腎方對(duì)慢性應(yīng)激肝郁模型大鼠排卵功能及PGE2、6-Keto-PGF1α、TNF-α的影響.pdf

1、目的:本課題根據(jù)中醫(yī)傳統(tǒng)理論,結(jié)合現(xiàn)代研究,通過(guò)復(fù)制慢性應(yīng)激肝郁雌性大鼠模型,以舒肝補(bǔ)腎中藥進(jìn)行干預(yù),分析肝郁對(duì)女性排卵功能及對(duì)血漿前列腺素E2(PGE2)、6-酮前列腺素F1α(6-Keto-PGF1α)、血清腫瘤壞死因子-α(TNF-α)含量的影響,再次探討肝郁與排卵功能異常的關(guān)系及舒肝補(bǔ)腎中藥的作用機(jī)理,對(duì)排卵功能異常的治療提供更為開(kāi)闊的科研思路和臨床治療依據(jù)。
　　方法:以三月齡的Wistar雌性大鼠為研究對(duì)象,利用束縛筒

2、和程控穿梭箱聲-電刺激復(fù)制慢性應(yīng)激肝郁大鼠模型,以絨毛膜促性腺激素(HCG)、尿促性腺激素(HMG)和中藥舒肝補(bǔ)腎方為實(shí)驗(yàn)用藥。將60只動(dòng)情周期表現(xiàn)正常的大鼠隨機(jī)分為5組,即正常對(duì)照組、肝郁模型組、HMG+HCG組、中藥高劑量組、中藥低劑量組,每組12只。在同種飼養(yǎng)條件下,正常對(duì)照組和肝郁模型組灌以等量蒸餾水,中藥高、低組分別灌以舒肝補(bǔ)腎方浸膏稀釋液高劑量(生藥濃度約3.744g/ml)和低劑量(生藥濃度約1.872g/ml),連續(xù)造模

3、及給藥20天。HMG+HCG組在造模的前17天同肝郁模型組一樣給予蒸餾水,第18天每只大鼠腹腔注射HMG40IU,48h后再腹腔注射HCG50IU,24h后處死。造模20天后,除HMG+HCG組外其余各組經(jīng)陰道涂片觀察挑選處于動(dòng)情期的大鼠并間隔24h處死,進(jìn)行指標(biāo)測(cè)定。動(dòng)態(tài)觀察大鼠動(dòng)情周期的變化;對(duì)照觀察卵巢組織形態(tài)學(xué)的改變;用放射免疫法檢測(cè)大鼠血漿PGE2、6-Keto-PGF1α及血清TNF-α的含量。
　　結(jié)果:(1)肝郁模

4、型組同正常對(duì)照組相比,大鼠的動(dòng)情周期出現(xiàn)不同程度的紊亂;卵巢組織形態(tài)學(xué)觀察,原始細(xì)胞數(shù)顯著增多(P<0.05),黃體數(shù)顯著減少(P<0.05);血漿PGE2、6-Keto-PGF1α及血清TNF-α含量異常顯著降低(P<0.05)。(2)注射HMG和HCG后,同肝郁模型組相比,HMG+HCG組大鼠的紊亂動(dòng)情周期并無(wú)明顯改善;卵巢組織形態(tài)學(xué)觀察,黃體數(shù)顯著增多(P<0.05);PGE2、TNF-α含量顯著升高(P<0.05),6-Keto

5、-PGF1α的含量無(wú)顯著差異(P>0.05);(3)經(jīng)中藥治療后,大鼠紊亂的動(dòng)情周期得到改善;卵巢組織形態(tài)學(xué)觀察,卵巢組織的異常形態(tài)得到一定糾正,成熟卵泡數(shù)顯著增多(P<0.05),黃體數(shù)顯著增多(P<0.05);血漿PGE2及血清TNF-α含量顯著升高(P<0.05),血漿6-Keto-PGF1α的含量無(wú)顯著差異(P>0.05)。
　　結(jié)論:用束縛筒制動(dòng)和聲-電刺激復(fù)制的慢性應(yīng)激肝郁動(dòng)物模型,是一個(gè)比較合理的肝郁證動(dòng)物模型。慢性

6、應(yīng)激刺激可致雌性大鼠神經(jīng)免疫內(nèi)分泌功能紊亂,從而導(dǎo)致排卵功能異常。本實(shí)驗(yàn)證明了中藥舒肝補(bǔ)腎方能對(duì)抗慢性應(yīng)激刺激對(duì)大鼠的影響,促進(jìn)排卵功能的恢復(fù)。舒肝補(bǔ)腎方能明顯改善大鼠動(dòng)情周期的紊亂,其作用優(yōu)于西藥HMG和HCG;同時(shí),舒肝補(bǔ)腎方還可改善卵巢的異常形態(tài),使大鼠異常降低的PGE2、TNF-α的水平顯著升高,6-Keto-PGF1α呈升高趨勢(shì),從而改善了微循環(huán),促進(jìn)卵子發(fā)育成熟和排卵。本實(shí)驗(yàn)從多方面探討了舒肝補(bǔ)腎方對(duì)慢性應(yīng)激肝郁模型大鼠排卵