HBV影響IFN-γ受體表達(dá)及降低IFN-γ-p-Stat-1信號(hào)敏感性的研究.pdf

1、第一部分:該研究通過(guò)檢測(cè)不同臨床類型慢性乙型肝炎患者外周血白細(xì)胞IFNGR1及血清IFN-γ水平差異,以進(jìn)一步探索γ干擾素在慢性肝炎免疫病理及病毒清除中發(fā)揮的作用.方法:采用流式細(xì)胞技術(shù)及夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)53例慢性乙型肝炎患者外周血白細(xì)胞IFNGR 1表達(dá)及血清IFN-γ水平變化,并與血清生物化學(xué)指標(biāo)、乙肝病毒學(xué)指標(biāo)、肝組織病理變化進(jìn)行相關(guān)分析.結(jié)論:①慢性乙型肝炎患者淋巴細(xì)胞膜IFNGR 1水平與總膽紅素顯著正相關(guān);②與肝組織炎

2、癥活動(dòng)度顯著正相關(guān);③與HBeAg滴度及HBV DNA載量呈顯著負(fù)相關(guān).④慢性乙型肝炎患者淋巴細(xì)胞膜IFNGR1表達(dá)上調(diào),可能增加γ干擾素參與乙型肝炎免疫病理及病毒清除的敏感性.第二部分:目的:探索HBV基因持續(xù)復(fù)制和表達(dá)對(duì)HepG2細(xì)胞IFN-γ/STAT-1信號(hào)活化及IFN-γ/MHC-1誘導(dǎo)表達(dá)的影響;并從IFNGR水平探索其機(jī)制,為提示HBV影響毒IFN-γ抗病毒效應(yīng)及HBV持續(xù)性感染機(jī)制打下基礎(chǔ).方法:以HepG2.2.15、

3、HepG2該兩株肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞株及人正常細(xì)胞株LO2為研究對(duì)象,觀測(cè)不同時(shí)間段IFN-γ/p-STAT-1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及不同劑量的IFN-γ/MHC-1誘導(dǎo)效應(yīng);拉米夫定抑制HBV DNA,檢測(cè)HepG2.2.15細(xì)胞IFN-γ誘導(dǎo)的HepG2.2.15MHC-1表達(dá).采用流式細(xì)胞術(shù)、western-blot及半定量RT-PCR等方法,從轉(zhuǎn)錄水平、蛋白水平檢測(cè)IFN-γ受體1的表達(dá)差異;同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞IFN-γ/R1對(duì)IFN-γ的結(jié)合能力.W