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文檔簡介
1、目的:賁門癌是常見的消化道惡性腫瘤之一。我國流行病學(xué)統(tǒng)計(jì),近年來,賁門癌的發(fā)病率和死亡率均呈逐漸上升的趨勢,但其確切的發(fā)病機(jī)制還不甚明確。因而對賁門癌發(fā)病機(jī)制的研究越來越受到國內(nèi)外學(xué)者的重視。這一研究對賁門癌的早期診斷和早期治療具有極其重要的臨床意義。在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中,癌前病變是一個(gè)較活躍、不穩(wěn)定的階段,其具有雙向轉(zhuǎn)歸的特性,在這一階段可能涉及多種基因、蛋白的表達(dá)異常,為了探討在賁門癌發(fā)生發(fā)展過程中分子生物學(xué)行為在其發(fā)病中的作用,
2、我們應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法對129例賁門標(biāo)本(其中炎癥20例、Ⅰ級(jí)不典型增生20例、Ⅱ級(jí)不典型增生16例、Ⅲ級(jí)不典型增生6例、賁門癌67例)進(jìn)行研究。通過檢測Survivin、Cyclin-E在賁門癌及癌前病變中的表達(dá),以期了解賁門癌及癌前病變組織中Survivin、Cyclin-E的表達(dá)狀況及其分子生物學(xué)行為與細(xì)胞凋亡和血管形成的關(guān)系,為臨床工作提供分子生物學(xué)診斷信息。 方法:1收集賁門粘膜標(biāo)本,其中炎癥、不典型增生來自電子胃鏡
3、活檢標(biāo)本;賁門癌來自手術(shù)和胃鏡活檢標(biāo)本。2對賁門標(biāo)本進(jìn)行病理組織學(xué)診斷。3應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測Survivin和Cyclin-E的表達(dá);應(yīng)用TUNEL法檢測凋亡細(xì)胞,并計(jì)算凋亡指數(shù)(AI);應(yīng)用鼠抗人第八因子相關(guān)抗原(Ⅷ-RAg)抗體標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞,測定腫瘤微血管密度(MVD)。4統(tǒng)計(jì)分析,并對結(jié)果進(jìn)行討論。 結(jié)果:1病理組織學(xué)診斷結(jié)果:腺癌:癌細(xì)胞形成大小不一,排列不規(guī)則的腺樣結(jié)構(gòu),細(xì)胞常不規(guī)則的排列成多層,核大小不一,
4、核分裂像多見。 不典型增生根據(jù)細(xì)胞異型性、結(jié)構(gòu)、分化情況進(jìn)行診斷。Ⅰ級(jí)不典型增生:腺管結(jié)構(gòu)輕度不規(guī)則,主要分布于粘膜淺層或僅見于深部,粘液分泌空泡減少,核成圓形或桿狀,核稍大,核排列較密集,位于細(xì)胞基底側(cè)。Ⅱ級(jí)不典型增生:腺管結(jié)構(gòu)不規(guī)則,形態(tài)大小不一,腺管呈分枝狀,排列較緊密,分泌物減少或消失,核大、深染、密集、核圓形成桿狀,排列稍顯紊亂。Ⅲ級(jí)不典型增生:腺管結(jié)構(gòu)紊亂,形狀和大小不一,表面腺管常呈鋸齒狀,分泌空泡幾乎消失,核大、
5、深染、核圓形或桿狀,排列紊亂,并突向細(xì)胞游離端。 其中賁門炎20例,不典型增生42例(Ⅰ級(jí)20例、Ⅱ級(jí)16例、Ⅲ級(jí)6例),賁門癌67例(分化型46例、低分化型12例、未分化型9例)。 2免疫組織化學(xué)結(jié)果:Survivin和Cyclin-E定位于細(xì)胞核,在炎癥組織中可見少量細(xì)胞漿內(nèi)表達(dá),免疫組織化學(xué)陽性信號(hào)呈棕黃色和/或棕褐色顆粒。TUNEL染色陽性反應(yīng)物質(zhì)呈棕黃色顆粒,位于細(xì)胞核內(nèi),呈現(xiàn)均勻的染色,凋亡細(xì)胞在賁門粘膜病變
6、中呈彌散性、簇狀、和/或散在分布。未凋亡細(xì)胞染色極淺,輪廓不清。應(yīng)用鼠抗人第八因子相關(guān)抗原(Ⅷ-RAg)抗體標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞。計(jì)算賁門癌組織內(nèi)著色毛細(xì)血管和微小血管數(shù),呈棕色單個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞群者作為一個(gè)血管計(jì)數(shù)。 Survivin蛋白和Cyclin-E蛋白在賁門癌及癌前病變組織中均有不同程度的表達(dá),從Ⅰ級(jí)不典型增生到賁門癌有逐漸增高的趨勢。賁門癌組織中兩者的表達(dá)陽性率顯著高于賁門炎組織和Ⅰ、Ⅱ級(jí)不典型增生組織(P<0.05
7、);Ⅲ級(jí)不典型增生組織中兩者的表達(dá)陽性率顯著高于Ⅱ級(jí)不典型增生組織(P<0.05);Ⅲ級(jí)不典型增生組織中兩者的表達(dá)陽性率與賁門癌組織中的表達(dá)陽性率無顯著性差異(P>0.05)。兩者在未分化型腺癌組織中的表達(dá)陽性率最高(100%和88.89%),在分化型腺癌組織中最低(36.96%和32.61%),三組比較差異顯著(P<0.05)。兩者的表達(dá)狀況呈正相關(guān)(r=0.881,P<0.05)。 凋亡指數(shù)(AI)結(jié)果:Ⅲ級(jí)不典型增生組織中
8、和賁門癌組織中的AI顯著低于賁門炎組織和Ⅰ、Ⅱ級(jí)不典型增生(P<0.05)。從賁門炎到Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)不典型增生到賁門癌AI有逐漸下降的趨勢,與Survivin蛋白的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性(r=-0.912,P<0.05)。 在賁門癌不同病理類型中,MVD不同。未分化型腺癌最高(78.89±18.31),分化型腺癌最低(32.75±7.53),三者比較差異顯著(P<0.05)。MVD與Survivin蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)性(r=0.997,P
9、<0.05),與AI呈負(fù)相關(guān)性(r=-0.99,P<0.05)。 結(jié)論:1Survivin和Cyclin-E在賁門Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)不典型增生組織和賁門癌組織中的表達(dá)呈逐漸升高的趨勢。 2Survivin和Cyclin-E在賁門癌和Ⅲ級(jí)不典型增生組織中的表達(dá)高于Ⅰ、Ⅱ級(jí)不典型增生組織中的表達(dá)。 3細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)不典型增生和賁門癌組織中呈逐漸下降的趨勢。 4Survivin和Cyclin-E的
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