黏蛋白MUC2、MUC5AC及MUC6在胃印戒細(xì)胞癌組織中的表達(dá)及意義.pdf

1、背景和目的 胃癌是我國(guó)最常見的惡性腫瘤之一。其發(fā)生、發(fā)展是多因素、多階段共同作用的結(jié)果。在胃癌的分類中，2000年世界衛(wèi)生組織把胃印戒細(xì)胞癌定義為：散在的或小團(tuán)狀的胞漿內(nèi)含有黏液的惡性腫瘤細(xì)胞占腫瘤細(xì)胞50﹪以上。并根據(jù)細(xì)胞形態(tài)分為5種類型：經(jīng)典型(Ⅰ型)，組織細(xì)胞樣型(Ⅱ型)，胞漿嗜伊紅型(Ⅲ型)，小細(xì)胞型(Ⅳ型)，問(wèn)變細(xì)胞型(Ⅴ型)。該腫瘤發(fā)病年齡較年輕，具有侵襲性強(qiáng)、進(jìn)展快、惡性程度高的特點(diǎn)，臨床治療效果及預(yù)后較差。研究表

2、明黏液的異常表達(dá)與腫瘤發(fā)生及惡性進(jìn)展密切相關(guān)。印戒細(xì)胞癌中癌細(xì)胞內(nèi)含有黏液，其與印戒細(xì)胞癌的生物學(xué)行為的關(guān)系有待進(jìn)一步探索。 黏液基因蛋白(mucin，MUC)，簡(jiǎn)稱黏蛋白，有多種不同結(jié)構(gòu)類型，是由體內(nèi)多種上皮細(xì)胞分泌的大分子量的糖蛋白，是黏液的主要成分。在正常人體內(nèi)，它廣泛分布于胃腸道、呼吸道、生殖道等上皮細(xì)胞內(nèi)，對(duì)上皮起潤(rùn)滑和保護(hù)作用。其中．MUC2、MUC5AC及MUC6三種黏液基因均定位于11p15.5位點(diǎn)上，但是生理狀

3、態(tài)下MUC2只在正常腸黏膜中表達(dá)，又稱腸型黏液：MUC5AC及MUC6只在正常胃黏膜中表達(dá)，又稱胃型黏液。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)表達(dá)不同黏液類型的胃癌，如腸型(Intestinal type，type I)胃癌(只表達(dá)腸型黏液)、胃型(Gastric type，typeG)胃癌(只表達(dá)胃型黏液)、胃腸型(Gastric and Intestinal type，type GI)胃癌(同時(shí)表達(dá)腸型和胃型黏液)、未分類型(Unclassified t

4、ype，type U)胃癌(未查見黏液表達(dá))其生物學(xué)行為不盡相同。三種黏液基因蛋白(MUC2、MUC5AC及MLJC6)在胃印戒細(xì)胞癌中的表達(dá)及其與細(xì)胞類型、生物學(xué)行為的關(guān)系國(guó)內(nèi)外報(bào)道較少。本研究運(yùn)用免疫組織化學(xué)SP方法檢測(cè)MUC2、MUC5AC、MUC6在胃印戒細(xì)胞癌組織和非腫瘤胃黏膜中的蛋白表達(dá)；采用原位雜交技術(shù)檢測(cè)了MUC2在胃印戒細(xì)胞癌組織和非腫瘤胃黏膜中的mRNA。探討?zhàn)さ鞍譓UC2、MUC5AC及MUC6在胃印戒細(xì)胞癌中的表

5、達(dá)和聯(lián)合表達(dá)的意義。 材料與方法 1.標(biāo)本：選用鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科2002年1月～2004年12月間胃印戒細(xì)胞癌手術(shù)切除的存檔石蠟包埋組織標(biāo)本68例，均有非腫瘤胃黏膜對(duì)照，患者術(shù)前均未行放化療。按發(fā)病部位分為賁門30例、胃底及胃體12例、胃竇和幽門部26例。按細(xì)胞形態(tài)分為：Ⅰ型29例、Ⅱ型18例、Ⅲ型12例、Ⅳ型5例、Ⅴ型4例。 2.方法：應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)68例胃印戒細(xì)胞癌組織和相應(yīng)標(biāo)本的非腫瘤

6、胃黏膜中MUC2、MUC5AC、MUC6的表達(dá)。應(yīng)用原位雜交技術(shù)檢測(cè)了68例胃印戒細(xì)胞癌組織和相應(yīng)標(biāo)本的非腫瘤胃黏膜中MUC2 mRNA。 3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS10.0軟件包對(duì)所有資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。兩樣本率的比較采用四格表資料的X<'2>檢驗(yàn)和Fisher′檢驗(yàn)；多樣本率的比較采用行X列表X<'2>檢驗(yàn)；兩變量問(wèn)的相關(guān)分析采用Spearman相關(guān)分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。 結(jié)果 1.MUC

7、2蛋白在非腫瘤胃黏膜的陽(yáng)性表達(dá)率為0﹪，在胃印戒細(xì)胞癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率為29.4﹪，兩組之間有顯著性差異(P<0.05)；MUC2蛋白在男性患者的陽(yáng)性表達(dá)率為36﹪，在女性患者的陽(yáng)性表達(dá)率11.1﹪，兩組之間有顯著性差異(P<0.05)；MUC2蛋白在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組陽(yáng)性表達(dá)率為21.7﹪，在無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽(yáng)性表達(dá)率為45.5﹪，兩組之間有顯著性差異(P<0.05)。MUC2蛋白的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性分析P<0.05，Ts=-0.3

8、12，MUC2蛋白的表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)。而在發(fā)病年齡、部位、腫瘤大小、脈管侵犯、神經(jīng)侵犯、浸潤(rùn)深度、TNM分期及細(xì)胞形態(tài)分型上無(wú)顯著性差異(P>0.05)。 2．MUC2 mRNA在非腫瘤胃黏膜的陽(yáng)性率為0﹪，在胃印戒細(xì)胞癌組織中陽(yáng)性率為60．3﹪，兩組之間有顯著性差異(P<0.05)；而在性別、發(fā)病年齡、部位、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管侵犯、神經(jīng)侵犯、浸潤(rùn)深度、TNM分期及細(xì)胞形態(tài)分型上無(wú)顯著性差異(p>0.05)。MU

9、C2蛋白在胃印戒細(xì)胞癌組織中表達(dá)與MUC2 mRNAZ間沒(méi)有顯著相關(guān)性(P>0.05)。 3．MUC5AC蛋白在非腫瘤胃黏膜的陽(yáng)性表達(dá)率為92．6﹪，在胃印戒細(xì)胞癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率為64．7﹪，兩組之間有顯著性差異(P<0.05)。MUC5AC蛋白在最大徑≤5cm組陽(yáng)性表達(dá)率為74．5﹪，在最大徑>5cm組的陽(yáng)性表達(dá)率為42．9﹪，兩組之間有顯著性差異(P<0.05)：MUC5AC蛋白在浸潤(rùn)深度T2的陽(yáng)性表達(dá)率為923﹪，在T

10、3的陽(yáng)性表達(dá)率為58．2﹪，兩組之間有顯著性差異(P<0.05)。MUC5AC蛋白的表達(dá)與腫瘤大小、浸潤(rùn)深度的相關(guān)性分析：MUC5AC蛋白的表達(dá)與腫瘤大小的相關(guān)分析P<0.05，Υ <,s>=．0．306；與浸潤(rùn)深度的相關(guān)性分析P<0.05，Υ<,s>=-0．281。MUC5AC蛋白的表達(dá)與腫瘤大小、浸潤(rùn)深度呈負(fù)相關(guān)。而在性別、年齡、部位、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管侵犯、神經(jīng)侵犯、TNM及細(xì)胞形態(tài)分型上無(wú)顯著性差異(P>0.05)。 4

11、．MUC6蛋白在非腫瘤胃黏膜的陽(yáng)性表達(dá)率為88．2﹪，在胃印戒細(xì)胞癌組織中陽(yáng)性表達(dá)率為39．7﹪，兩組之間有顯著性差異(P<0.05)：MUC6蛋白在男性患者的陽(yáng)性表達(dá)率為32﹪，在女性患者陽(yáng)性表達(dá)率為61．1﹪，兩組之間有顯著性差異(P<0.05)；MUC6蛋白在胃底/胃體陽(yáng)性表達(dá)率為58．3﹪，在胃竇和幽門部陽(yáng)性表達(dá)率為50﹪，在賁門部陽(yáng)性表達(dá)率為23．3﹪，賁門部與胃底和胃體、胃竇和幽門部之間有顯著性差異(P<0.05)。而在性別

12、、年齡、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管侵犯、神經(jīng)侵犯、浸潤(rùn)深度、TNM及細(xì)胞形態(tài)分型上無(wú)顯著性差異(P>0.05)。 5．在Ⅰ型細(xì)胞形態(tài)中MUC2、MUC5AC、MUC6的陽(yáng)性表達(dá)率分別為41．4﹪、62．1﹪、31﹪，其中MUC5AC與MUC6的表達(dá)率有顯著性差異(P<0.05)。在Ⅱ型細(xì)胞形態(tài)中MUC2(27．8﹪)、MUC5AC(66．7﹪)、MUC6(44．4﹪)的表達(dá)差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；但MUC5AC與M

13、UC2的表達(dá)率有顯著性差異(P<0.05)。在Ⅲ型細(xì)胞形態(tài)中MUC2的表達(dá)(16．7﹪)低于MUC5AC(50﹪)、MUC6(33-3﹪)的表達(dá)，但沒(méi)有顯著性差異(P>0.05)。在Ⅳ型細(xì)胞形態(tài)中MUC2的表達(dá)(0﹪)明顯低于MUC5AC(100﹪)、MUC6(80﹪)的表達(dá)，有顯著性差異(P<0.05)。在V型細(xì)胞形態(tài)中MUC2(25﹪)、MUC5AC(72﹪)、MUC6(50﹪)的表達(dá)沒(méi)有顯著性差異(P>0.05)。 6.

14、在黏液聯(lián)合表達(dá)上G、GI、I、U四型胃印戒細(xì)胞癌在性別、年齡、發(fā)病部位、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、脈管侵犯、神經(jīng)侵犯、浸潤(rùn)深度、TNM分期及細(xì)胞形態(tài)分型上無(wú)顯著性差異(P>0.05)。 7.胃印戒細(xì)胞癌不同細(xì)胞形態(tài)分型在腫瘤的發(fā)生部位(賁門、胃底/胃體、胃竇/幽門)上的分布有顯著性差異(P<0.05)，進(jìn)一步分析在賁門部發(fā)病率Ⅲ型(83.3﹪)明顯高于Ⅱ(48-3﹪)、Ⅳ(27.8﹪)、V(0﹪)型的發(fā)病率，有顯著性差異(P<0.

15、05)。MUC2、MUC5AC,MUC6蛋白三者之間均無(wú)顯著相關(guān)性(P>0.05)。 結(jié)論 1. MUC2蛋白和MUC2 mRNA表達(dá)增高，MUC5AC蛋白和MUC6蛋白表達(dá)降低可能與胃印戒細(xì)胞癌的發(fā)生有關(guān)。MUC2蛋白在胃印戒細(xì)胞癌中的表達(dá)與MUC2 mRNA之間無(wú)顯著相關(guān)性，MUC2蛋白表達(dá)的增高可能部分是由于蛋白翻譯水平上調(diào)或蛋白穩(wěn)定性增高所致。 2.胃印戒細(xì)胞癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組MUC2蛋白表達(dá)率低，MUC2