肝特異性Lass2敲除對小鼠miR-694及脂代謝的影響.pdf

1、目的：人源性長壽保障基因Ⅱ型(Longevity assurance gene2，Lass2)是人和小鼠的長壽保障基因Lass家族成員。近年來的研究提示Lass2全身敲除的小鼠可自發(fā)肝細(xì)胞肝癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)。本研究為探討肝特異性Lass2突變易感肝癌的機(jī)制，研究了肝特異性Lass2敲除對microRNA-694及脂代謝的影響。
　　方法：實(shí)驗(yàn)分Lass2敲除小鼠(Knock out，K

2、O)組和對照C57/BL6野生型小鼠(wild type，WT)組，每組各10只，雄性，1月齡。取小鼠血清檢測血脂總膽固醇(total cholestro，TC)、甘油三脂(Triglyceride，TG)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)指標(biāo);取肝組織，一部分做冰凍切片油紅O染色;另一部分肝組織用于提取總RNA和總蛋白、Western blot分析肝組織中ALB的表達(dá)、基因芯片分析、并通過QT-P

3、CR方法驗(yàn)證差異基因之一miR-694及其預(yù)測靶基因腫瘤壞死因子-α誘導(dǎo)蛋白3(tumor necrosis factorα-1 induced protein3，Tnfaip3)的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：Lass2KO小鼠血清生化檢測結(jié)果顯示KO組的血脂TC、LDL較WT小鼠顯著升高(P＜0.05);油紅O染色結(jié)果顯示肝小葉周邊肝細(xì)胞內(nèi)脂滴沉積增加（脂滴被染成紅色）;Western blot結(jié)果顯示ALB的表達(dá)下調(diào)。qPCR結(jié)果中

4、Lass2敲除小鼠miR-694在肝組織中的表達(dá)下調(diào)(P＜0.01)，其靶基因TNFAIP3表達(dá)上調(diào)(P＜0.01)。
　　結(jié)論：本研究結(jié)果表明，肝特異性Lass2敲除小鼠肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，脂代謝紊亂，肝組織miR-694表達(dá)下調(diào)，且miR-694預(yù)測靶基因有脂肪代謝相關(guān)基因，提示Lass2敲除后miR-694下調(diào)可能是引起肝臟脂類代謝紊亂，加重肝損傷，為促肝癌發(fā)生的因素之一。本實(shí)驗(yàn)不僅有助于加深對肝癌發(fā)生發(fā)展分子機(jī)制的認(rèn)識，也