噪聲對特異性敲除外毛細胞Mylk基因小鼠聽功能及形態(tài)學(xué)影響的初步研究.pdf

1、[背景]細胞骨架結(jié)構(gòu)在聲信號傳遞過程中起著重要的作用。許多噪聲性聾病是由細胞骨架結(jié)構(gòu)改變引起的。毛細胞骨架相關(guān)蛋白(以F-action為代表的一系列細胞骨架相關(guān)蛋白)的表達在噪聲暴露后維持外毛細胞結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定，減輕外毛細胞的損傷中起到重要作用。肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK，myosin light chain kinase)能夠通過磷酸化Ⅱ型肌球蛋白的輕鏈及與肌動球蛋白的交互作用來調(diào)節(jié)細胞骨架。故而我們推斷MLCK對噪聲暴露所致的聽力損傷也

2、可能起到重要的保護作用。
　　[方法]本研究中我們應(yīng)用Cre/LoxP基因遺傳突變系統(tǒng)建立了在耳蝸外毛細胞(outer hair cell，OHC)特異性敲除Mytk基因的小鼠。通過高聲強噪聲實驗系統(tǒng)建立噪聲性聾實驗動物模型，采用聽覺電生理測試、耳蝸基底膜鋪片、免疫熒光、顯微照相及圖像分析等技術(shù)方法，定量研究實驗動物聽閾的變化、外毛細胞缺失率。
　　[結(jié)果]成功建立了Mylk基因敲除組及對照組(CTR)小鼠；聽性腦干反應(yīng)檢測

3、結(jié)果示：基因未敲除組和基因敲除組在無噪聲暴露的條件下，聽功能檢測無明顯差異；基因敲除+噪聲組和基因未敲除+噪聲組于1d、10d后的ABR閾值較噪聲暴露前有明顯提高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；基因敲除+噪聲組在噪聲暴露前后的閾移較基因未敲除+噪聲組高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；予耳蝸基底膜鋪片熒光染色后發(fā)現(xiàn)基因敲除+噪聲組和基因未敲除+噪聲組中存在外毛細胞的凋亡、壞死和缺失的細胞，其中基因敲除+噪聲組的受損率較明顯。
　　[結(jié)論]我們推斷MLCK作