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文檔簡介
1、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BM-MSCs)在許多體外實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出對(duì)異體T淋巴細(xì)胞的抑制作用,而T細(xì)胞免疫可參與許多疾病的發(fā)生發(fā)展,特別是與異基因干細(xì)胞移植后排斥反應(yīng)、移植物抗宿主病有密切關(guān)系,因此MSCs在體外試驗(yàn)中所表現(xiàn)出的免疫調(diào)節(jié)作用有積極的臨床意義,值得進(jìn)一步深入研究。 為了探討MSCs在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中對(duì)細(xì)胞免疫功能的影響,本研究選擇獼猴作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,首先分離、培養(yǎng)BM-MSCs,然后將獼猴分為兩組:靜脈輸注MSCs組(Ⅳ組)和髓內(nèi)注
2、射MSCs組(IBM組),兩組均不做任何其它處理,直接將異體MSCs輸注給受者猴,輸注數(shù)量為4.0×104/kg-2.0×106/kg,通過定期監(jiān)測外周血象、T淋巴細(xì)胞亞群、混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)(MLR)、體外皮膚移植試驗(yàn)和TUNEL試驗(yàn)來判斷MSCs輸注后受者細(xì)胞免疫功能的變化,同時(shí)考察不同輸注方式和不同輸注數(shù)量對(duì)MSCs的細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)作用的影響。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果:異體MSCs輸注后,兩組均未發(fā)生急性毒性反應(yīng)和移植物抗宿主病(GVHD)
3、表現(xiàn),外周血象無明顯變化。 在Ⅳ組和IBM組,MSCs異體輸注都可以在一定時(shí)間內(nèi)(2周左右)抑制受者T淋巴細(xì)胞在MLR中的增殖活性。抑制程度的大小用MLR相對(duì)反應(yīng)值(RR)的變化值(△RR)表示,△RR=RR輸注前—RR輸注后。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析,抑制程度與MSCs數(shù)量(4.0×105/kg、1.0×105/kg、2.0×106/kg)呈正相關(guān),這種抑制在IBM組更明顯,P<0.05。 Ⅳ組中的受者A4及IBM組中的受者B7是兩
4、組中輸注MSCs數(shù)量最多的受者(2.0×106/kg),分別從輸注后第14天和7天開始,外周血CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+細(xì)胞的百分比與輸注前相比有所降低,在輸注后30天左右恢復(fù)至輸注前水平;B7比A4外周血T淋巴細(xì)胞亞群比例下降持續(xù)的時(shí)間長約1周。兩組中其它受者未見類似變化。 Ⅳ組和IBM組中,MSCs異體輸注均可以暫時(shí)(20天左右)誘導(dǎo)受者T淋巴細(xì)胞對(duì)供者及第三者皮膚移植物的非特異性免疫耐受。TUNEL試驗(yàn)中
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