X射線誘導(dǎo)人外周血細(xì)胞炎癥相關(guān)基因表達(dá)水平.pdf

1、目的：
　　篩選與炎癥反應(yīng)相關(guān)的電離輻射響應(yīng)基因，分析不同劑量X射線照射誘導(dǎo)人外周血炎癥相關(guān)基因的表達(dá)譜差異、劑量-效應(yīng)關(guān)系、時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系及其在正常人群中的表達(dá)水平，探討電離輻射誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)機(jī)制和利用炎癥相關(guān)基因表達(dá)改變建立輻射早期生物劑量計(jì)的可行性。
　　方法：
　　1.X射線照射后炎癥相關(guān)基因的表達(dá)譜測(cè)定:以劑量為0、0.5、3和10Gy的X射線照射1名健康女性的外周血，用定量PCR芯片(quantitativ

2、ereversetranscription-polymerasechainreaction(qPCR)array)檢測(cè)照射后24h的炎癥相關(guān)基因mRNA表達(dá)變化。
　　2.炎癥相關(guān)電離輻射響應(yīng)基因表達(dá)的劑量-效應(yīng)關(guān)系和時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系:以劑量為0、0.5、1、3、5、8、10和12Gy的X射線照射健康人外周血，用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法(real-timefluorescentquantitativereversetranscript

3、ionpolymerasechainreaction,Q-RT-PCR)檢測(cè)CD40LG、BIRC2、IFNG、TNFSF4、CCL2和CCL7在照射后6、12和24hmRNA表達(dá)變化。
　　3.炎癥相關(guān)電離輻射響應(yīng)基因在正常人群外周血中的mRNA表達(dá)水平:應(yīng)用Q-RT-PCR方法檢測(cè)TNFSF4、CCL2和CCL73個(gè)基因在正常人群中的mRNA相對(duì)表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　1.X射線照射后炎癥相關(guān)基因的表達(dá)譜測(cè)定:

4、QPCR芯片技術(shù)檢測(cè)到各劑量組差異表達(dá)基因共62個(gè)。0.5Gy照射后有9個(gè)基因表達(dá)上調(diào)，19個(gè)基因表達(dá)下調(diào);3Gy照射后有8個(gè)基因表達(dá)上調(diào)，19個(gè)基因表達(dá)下調(diào);10Gy照射后有16個(gè)基因表達(dá)上調(diào)，32個(gè)基因表達(dá)下調(diào)。31個(gè)基因只在特定劑量照射后表達(dá)發(fā)生變化，10個(gè)基因在所有檢測(cè)劑量照射后均發(fā)生顯著變化。
　　2.炎癥相關(guān)電離輻射響應(yīng)基因表達(dá)的劑量-效應(yīng)關(guān)系和時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系:CD40LG、BIRC2、IFNG、CCL2和CCL75個(gè)

5、基因mRNA相對(duì)表達(dá)變化與照射劑量和照射后培養(yǎng)時(shí)間不相關(guān)(P＞0.05)。不同劑量X射線照射誘導(dǎo)TNFSF4基因mRNA相對(duì)表達(dá)變化呈現(xiàn)劑量-效應(yīng)關(guān)系（F=5.765，P=0.013）且照射后6h和12h的劑量-效應(yīng)關(guān)系較照射后24h好;TNFSF4基因mRNA相對(duì)表達(dá)變化與照射后培養(yǎng)時(shí)間不相關(guān)(P＞0.05)，但隨著培養(yǎng)時(shí)間的增加有表達(dá)上調(diào)的趨勢(shì)。
　　3.炎癥相關(guān)電離輻射響應(yīng)基因在正常人群外周血中的表達(dá)水平:正常人群中TNFS