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1、目的:研究視網(wǎng)膜光損傷動(dòng)物模型中,視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)的變化以及視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡的情況;移植GFP-BMSCs至視網(wǎng)膜光損傷大鼠的視網(wǎng)膜下腔,觀察移植的細(xì)胞對(duì)視網(wǎng)膜的作用。
方法:1.視網(wǎng)膜光損傷大鼠造模:長(zhǎng)時(shí)間循環(huán)光照SD大鼠制成視網(wǎng)膜光損傷模型,于光照后第3d、7d、10d、14d摘除眼球,行HE染色觀察視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)的變化及TUN EL檢測(cè)視網(wǎng)膜細(xì)胞的凋亡情況。
2. GFP-BMSCs視網(wǎng)膜下腔移植:將GFP-BMS
2、Cs移植入視網(wǎng)膜光損傷大鼠的視網(wǎng)膜下腔,移植7d后,采用HE染色、TUNEL檢測(cè)、免疫熒光、realtime-PCR觀察正常對(duì)照組、光損傷造模組、BMSCs注射組、DMEM注射組的視網(wǎng)膜外核層厚度、視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡數(shù)以及神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(bFGF、BDNF)的表達(dá)情況;采用免疫熒光、realtime-PCR觀察 BMSCs注射組移植后的第1d、3d、7d、14d、21d,移植細(xì)胞遷移現(xiàn)象以及bFGF、BDNF的表達(dá)情況。
結(jié)果:1.
3、HE染色觀察到視網(wǎng)膜外核層的厚度隨著光照時(shí)間的增加而變??;TUNEL顯示視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡數(shù)隨著光照時(shí)間的延長(zhǎng)而增加。
2. GFP-BMSCs移植后可阻止視網(wǎng)膜外核層厚度變薄(P<0.05),還使視網(wǎng)膜細(xì)胞的凋亡數(shù)減少(P<0.05);免疫熒光顯示四組表達(dá)神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的定位不盡相同,免疫熒光、RT-PCR檢測(cè)分別顯示移植后bFGF、BDNF的表達(dá)量及其mRNA的表達(dá)量均增多(P<0.05)。免疫熒光、RT-PCR檢測(cè)顯示移植后的
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