食用菌產(chǎn)漆酶能力的比較及漆酶性能的研究.pdf

1、本實驗通過平板顯色分析方法對不同種類食用菌產(chǎn)漆酶能力進行了比較分析，大致可將十五種不同類型食用菌產(chǎn)漆酶的能力分為三類：一類是產(chǎn)漆酶能力較高的菌株，包括風杰1號、平菇3號、毛7811、白阿魏、虎奶菇，它們在平板分析中具有深藍綠色的邊緣小坑，有較高的漆酶酶活；二類是產(chǎn)漆酶能力不高的菌株，包括金8801、NG01、杏孢菇、小平ND、香魏菇，它們在平板分析中具有淺藍綠色的邊緣小坑，有漆酶存在，但酶活不高；三類是無產(chǎn)漆酶能力的菌株，包括大球蓋11

2、76、真姬菇515、茶3、真姬菇135、灰P，它們在平板分析中無藍綠色的邊緣小坑，無漆酶存在。實驗結(jié)果表明：食用菌產(chǎn)漆酶能力的大小與生長周期的長短有關(guān)，產(chǎn)漆酶能力較強的菌株生產(chǎn)周期較短，產(chǎn)漆酶能力較弱的菌株生產(chǎn)周期較長。 以ABTS為底物，測定漆酶酶活。從初篩的食用菌菌株中篩選選出漆酶活性較高的菌株--鳳尾菇Pleurotus eryngii(鳳杰一號)。并對該菌株進行漆酶發(fā)酵、純化、酶學性質(zhì)和染料脫色的研究，結(jié)果表明：該食用真

3、菌產(chǎn)漆酶的最適的培養(yǎng)基為：甘露醇1.0％、酵母浸粉1.5％、KH2PO40.3％、MgSO4·7H2O 0.15％。經(jīng)純化的酶催化ABTS氧化反應(yīng)的最適pH為4.5，溫度為65℃，60℃以下、pH4.5至6.0之間酶的穩(wěn)定性最好，以ABTS為底物的km為0.335 mmol·L-1，Vmax為0.795umol·L-1·min-1，反應(yīng)時間4-5 min為佳。純化后的酶在不同底物的作用下，ABTS的氧化能力最強，愈創(chuàng)木酚、氫醌、兒茶酚次

4、之，阿魏酸無氧化能力。疊氮化鈉是該漆酶高效抑制劑，濃度為0.5 mmol·L-1使漆酶活性完全抑制。該酶對三苯甲烷染料(孔雀綠、結(jié)晶紫)均有降解脫色性能，脫色率分別達到72.3％和50％，但該酶對孔雀綠的脫色能力比結(jié)晶紫要好，同時在體系中加入ABTS可提高脫色能力。 本文分析比較不同種類食用菌產(chǎn)漆酶的能力，從中篩選出漆酶酶活最高的菌株，這對進一步開發(fā)漆酶資源具有積極意義，為食用菌菌種遺傳改良提供依據(jù)，并為漆酶工業(yè)化生產(chǎn)與應(yīng)用奠定