RASSF1A與CLmRNA在胃癌中的表達(dá)及臨床意義的研究.pdf

1、目的：胃癌的發(fā)生和發(fā)展是一個(gè)多基因、多因素、多步驟、多階段的動(dòng)態(tài)順序演變過(guò)程，涉及到多種癌基因的異常激活、抑癌基因的缺失、突變失活及由此引起的細(xì)胞增殖失控而惡性轉(zhuǎn)化等腫瘤發(fā)生的分子基礎(chǔ)。
　　 RAS相關(guān)家族基因1A（RAS association domain family gene，RASSF1A）是2000年從人類(lèi)3號(hào)染色體短臂上克隆出來(lái)的新型候選抑癌基因。RASSF1A基因與RAS的效應(yīng)基因同源，其編碼產(chǎn)物被認(rèn)為是RAS

2、的效應(yīng)物，稱(chēng)之為RAS相關(guān)區(qū)域家族1A基因。在生理狀態(tài)下，RASSF1A不僅具有促進(jìn)生長(zhǎng)增殖的作用，同時(shí)還具有抑制生長(zhǎng)、促進(jìn)細(xì)胞凋亡和衰老的功能。RASSF1A在多種實(shí)體腫瘤中表達(dá)降低，參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。
　　 組織蛋白酶L（cathepsin L，CL）是一種可以由腫瘤細(xì)胞及其間質(zhì)細(xì)胞分泌的具有降解細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix，ECM）功能的半胱氨酸蛋白酶。CL以酶原的形式貯存于溶酶體中，其底物是

3、膠原、彈性蛋白、纖黏連蛋白，層黏連蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，與細(xì)胞連接關(guān)系密切。CL通過(guò)多種機(jī)制影響著腫瘤細(xì)胞的粘附和能動(dòng)性，它的激活可以破壞細(xì)胞外基質(zhì)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的游離和遷移。因此CL在腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移中起著重要的作用。
　　 本研究以胃癌患者為研究對(duì)象，采用RT-PCR方法檢測(cè)RASSF1A及CL mRNA在胃癌及正常胃粘膜中的表達(dá)，分析上述指標(biāo)與胃癌臨床生物學(xué)行為的關(guān)系，研究其在胃癌發(fā)生、發(fā)展及浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用。

4、　　 方法：選取河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院外三科2008年6月-2008年12月胃癌手術(shù)切除標(biāo)本共42例。分別采集胃癌和正常胃粘膜組織（距離腫瘤邊緣5cm以上），均經(jīng)術(shù)后病理證實(shí)。所有患者術(shù)前均未接受過(guò)放化療或生物治療等干預(yù)措施。采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（reverse transcription polymerase chain reaction，RT-PCR）技術(shù)，檢測(cè)胃癌及正常胃粘膜中RASSF1A和CL mRNA表達(dá)情況，分析二者

5、表達(dá)情況與胃癌患者性別、年齡，腫瘤部位、大小、大體分型、分化程度、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期等臨床生物學(xué)行為的關(guān)系，并以GAPDH作為內(nèi)參照標(biāo)準(zhǔn)。所有資料應(yīng)用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，p<0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1.胃癌組織RASSF1A mRNA的表達(dá)水平（0.42±0.27）明顯低于其在正常胃粘膜（1.27±0.48）中的表達(dá)水平（p<0.01.）。
　　 2.胃癌組織

6、CL mRNA的表達(dá)水平（2.39±0.46）明顯高于其在正常胃粘膜（1.20±0.34）中的表達(dá)水平（p<0.01）。
　　 3.胃癌組織RASSF1A mRNA在低分化組的表達(dá)水平（0.36±0.21）低于高、中分化組的表達(dá)水平（0.68±0.36），二者比較差異有顯著性（p<0.05）；在臨床分期中Ⅲ+Ⅳ期組的表達(dá)水平（0.35±0.18）低于Ⅰ+Ⅱ期組的表達(dá)水平（0.95±0.23），二者比較差異有顯著性（p<0.01）

7、。
　　 4.胃癌組織CL mRNA在浸潤(rùn)深度T3+T4組的表達(dá)水平（2.47±0.44）高于T1+T2組的表達(dá)水平（1.91±0.27），二者比較差異有顯著性（p<0.01）；在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)水平（2.50±0.42）高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達(dá)水平（2.17±0.48），二者比較差異有顯著性（p<0.05）；在臨床分期中Ⅲ+Ⅳ期組的表達(dá)水平（2.47±0.44）高于Ⅰ+Ⅱ期組的表達(dá)水平（1.86±0.25），二者比較差異有

8、顯著性（p<0.01）。
　　 5.胃癌組織中RASSF1A mRNA的表達(dá)水平在患者年齡、性別、腫瘤部位、腫瘤大小、大體分型、浸潤(rùn)深度及淋巴轉(zhuǎn)移分組中的差異無(wú)顯著性（p>0.05）。
　　 6.胃癌組織中CL的mRNA的表達(dá)水平在患者年齡、性別、腫瘤部位、腫瘤大小、大體分型及分化程度分組中的差異無(wú)顯著性（p>0.05）。
　　 7.胃癌組織中 RASSF1A mRNA的表達(dá)水平降低，而CLmRNA的表達(dá)水平升高

9、，二者存在一定的負(fù)相關(guān)（rs=-0.25），但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 1.RASSF1A mRNA在胃癌組織中的表達(dá)水平明顯低于正常胃黏膜組織，CL mRNA在胃癌組織中的表達(dá)水平明顯高于正常胃黏膜組織。說(shuō)明RASSF1A和CL參與了胃癌的發(fā)生。
　　 2.胃癌組織 RASSF1A mRNA的表達(dá)水平隨著分化程度的降低、臨床分期的增加而明顯降低。RASSF1A mRNA的表達(dá)降低預(yù)示著

10、胃癌惡性度高，臨床分期晚。
　　 3胃癌組織中CL mRNA的表達(dá)水平隨著浸潤(rùn)深度的加深、淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移、臨床分期的增加而明顯升高。CL mRNA的表達(dá)升高說(shuō)明胃癌侵襲轉(zhuǎn)移能力增強(qiáng)，臨床分期晚。
　　 4.胃癌組織中RASSF1A mRNA的表達(dá)水平在患者年齡、性別、腫瘤部位、腫瘤大小、大體分型、浸潤(rùn)深度及淋巴轉(zhuǎn)移分組中的差異無(wú)顯著性。
　　 5.胃癌組織中CLmRNA的表達(dá)水平在患者年齡、性別、腫瘤部位、腫瘤大小