低劑量米非司酮對(duì)人植入窗期子宮內(nèi)膜自然殺傷細(xì)胞數(shù)量及其亞型的影響.pdf

1、研究背景:隨著近代生命科學(xué)的發(fā)展,藥物避孕技術(shù)不斷推陳出新.米非司酮(mifepristone,RU486)是第一個(gè)用于臨床的孕激素受體拮抗劑,目前已廣泛應(yīng)用于抗早孕.20世紀(jì)90年代,國(guó)內(nèi)外均有報(bào)道米非司酮廣泛用于臨床緊急避孕,且用藥劑量在逐步減少.近年來(lái),研究發(fā)現(xiàn)每日給予低劑量米非司酮,能阻止內(nèi)膜發(fā)育而起避孕作用,即所謂的"內(nèi)膜避孕",對(duì)月經(jīng)周期影響少,無(wú)明顯副作用.在妊娠生理中,子宮內(nèi)膜對(duì)胚胎的容受性是妊娠建立的關(guān)鍵因素之一.在每

2、個(gè)有排卵的月經(jīng)周期中子宮內(nèi)膜僅在極短的時(shí)期內(nèi)(即正常月經(jīng)周期的20-24天)才允許胚泡植入,稱(chēng)為"著床窗"和"植入窗"(implantation window),此時(shí)子宮內(nèi)膜表現(xiàn)為特定細(xì)胞和分子事件的順序發(fā)生,且受許多因素調(diào)控.子宮自然殺傷細(xì)胞(uNK細(xì)胞)是妊娠子宮最主要的免疫職能細(xì)胞,在胚胎植入和胎盤(pán)形成中起重要作用,參與了植入相關(guān)因子的分泌、控制滋養(yǎng)細(xì)胞侵入、螺旋動(dòng)脈改造以及母胎界面免疫平衡的維持.大量研究表明植入窗期子宮內(nèi)膜NK

3、細(xì)胞數(shù)量及活性的異?？赡苁浅晒?shí)行工VF-ET后植入失敗和習(xí)慣性流產(chǎn)的原因之一. 本文利用體外培養(yǎng)系統(tǒng),運(yùn)用免疫組化和流式細(xì)胞技術(shù),研究低劑量米非司酮對(duì)人植入窗期子宮內(nèi)膜自然殺傷細(xì)胞數(shù)量及其亞型的影響,以探討低劑量米非司酮作為抗著床避孕藥的免疫學(xué)機(jī)制. 材料與方法:收集14例因輸卵管切除或丈夫不育,行IvF-ET婦女的子宮內(nèi)膜.入選婦女月經(jīng)史、生殖系統(tǒng)解剖、內(nèi)分泌等指標(biāo)均正常,近3個(gè)月內(nèi)無(wú)激素類(lèi)藥物使用史,于月經(jīng)周期第2

4、0至24天取內(nèi)膜.每例內(nèi)膜分成三等份,給予不同處理(分別為對(duì)照組、65 nmol/L組、200nmol/L組),組織培養(yǎng)24小時(shí).采用免疫組化EnVision二步法染色,測(cè)定子宮內(nèi)膜(CD56+細(xì)胞在不同處理組中的表達(dá).采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同處理組內(nèi)膜淋巴細(xì)胞中CD3-cD56+CD16-細(xì)胞亞型百分比和CD3-CD56+CDl6+細(xì)胞亞型百分比;NK細(xì)胞(CD3-CD56+細(xì)胞)百分比=CD3-CD56+CD16-細(xì)胞亞型百分比+CD

5、3-CD56+CD16+細(xì)胞亞型百分比. 結(jié)果： 1.子宮內(nèi)膜組織塊體外培養(yǎng)前后形態(tài)學(xué)觀察: 培養(yǎng)前后子宮內(nèi)膜均處于分泌中期,腺體、血管結(jié)構(gòu)均完整,間質(zhì)水腫無(wú)明顯改變. 2.子宮內(nèi)膜CD56+細(xì)胞數(shù)量的變化: CD56陽(yáng)性著色為棕黃色,定位于細(xì)胞膜,陽(yáng)性細(xì)胞主要分布在腺體和血管周?chē)拈g質(zhì).三組內(nèi)膜CD56陽(yáng)性細(xì)胞平均數(shù)分別為:對(duì)照組112.67±7.75,65nmol/L組145.50±9.43,

6、200nmol/L組149.33±4.47.三組CD56陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)有顯著差異(P=0.01);兩處理組分別與對(duì)照組相比,顯著增高(P<0.05);兩處理組之間比較無(wú)明顯差異(P>0.05). 3.子宮內(nèi)膜NK細(xì)胞亞型的變化: CD3-CD56+細(xì)胞亞型百分比分別為: 對(duì)照組(37.79±6.32)﹪,65nmol/L(47.50±7.71)﹪和200nmol/L組(51.41±7.61)﹪.兩處理組分別與對(duì)照組相比,顯著

7、增高(P<0.05);兩處理組之間比較無(wú)明顯差異(P>0.05). CD3-CD56+CD16-細(xì)胞亞型百分比分別為:對(duì)照組(35.19±6.23)﹪,65nmol/L組(45.16±7.33)﹪和200nmol/L組(48.18±7.25)﹪.兩處理組分別與對(duì)照組相比,顯著增高(P<0.05);兩處理組之間比較無(wú)明顯差異(P>0.05).CD3-CD56+CDl6+細(xì)胞亞型百分比分別為:對(duì)照組(2.60±0.76)﹪,65nm

8、ol/IJ組(2.34±0.67)﹪和200rlmol/L組(3.24±0.84)﹪.三組比較無(wú)明顯差異(P=0.39). 結(jié)論： 1.低劑量米非司酮能增加植入窗期子宮內(nèi)膜CD56+NK細(xì)胞數(shù)量,提示低劑量米非司酮可能通過(guò)促進(jìn)子宮內(nèi)膜NK細(xì)胞的過(guò)度增殖,破壞植入窗期子宮內(nèi)膜局部免疫微環(huán)境的平衡. 2.低劑量米非司酮能增加植入窗期子宮內(nèi)膜(;D3-CI)56+細(xì)胞及CD3-CD56+CD16-細(xì)胞亞型百分含量,但對(duì)