米曲霉菌株的誘變選育及其制劑的應(yīng)用研究.pdf

1、以米曲霉3.4383作為原始菌株，經(jīng)紫外、EMS復(fù)合誘變，通過(guò)培養(yǎng)篩選，得到一株高產(chǎn)蛋自酶和纖維素酶的變異菌株UV-2'。其蛋自酶和纖維素酶活比原始菌株(蛋自酶2526U/g，纖維素酶987U/g)提高到3250U/g和1145U/g，傳代培養(yǎng)20代，菌株遺傳穩(wěn)定性好。 確定復(fù)合誘變條件為：紫外線照射用30W紫外燈，距離為28cm，照射時(shí)聞為60s，EMS濃度為0.8％。復(fù)合誘變之后，從中篩選出一株蛋白酶活力高的菌株UV-2'，

2、其蛋白酶活和纖維素酶活較出發(fā)菌株分別提高29％和16％。 研究發(fā)酵培養(yǎng)條件對(duì)菌株產(chǎn)酶影響中發(fā)現(xiàn)：碳氮源、活性劑、培養(yǎng)基的料水比對(duì)菌株產(chǎn)酶都有影響；發(fā)酵溫度、發(fā)酵時(shí)間、pH、無(wú)機(jī)鹽等對(duì)菌株產(chǎn)酶也有影響。通過(guò)單因素試驗(yàn)確定的培養(yǎng)條件為：吐溫-80含量0.24％，料水比為5/3，pH7.5，在40℃下，發(fā)酵84h，酶活可達(dá)3250U/g和1145U/g干曲。探索出了FeSO4能強(qiáng)烈抑制菌株產(chǎn)酶，加入KNO3菌株產(chǎn)酶大大提高；并進(jìn)一步研

3、究了不同氮源和碳源對(duì)米曲霉UV-2'產(chǎn)蛋白酶和纖維素酶的影響。確定了飼料酶制劑生產(chǎn)中最佳的氮源和碳源分別為豆粕和麩皮，進(jìn)一步研究了發(fā)酵培養(yǎng)基中麩皮：豆粕=1:5。最后以上述各單因素試驗(yàn)結(jié)果做參照，設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)來(lái)確定綜合因素對(duì)菌株產(chǎn)酶的影響，通過(guò)正交試驗(yàn)結(jié)果可知，發(fā)酵培養(yǎng)物的最適合條件為：培養(yǎng)基在豆粕含量60％，麩皮含量10％，添加0.2％的KNO3，吐溫-80含量在0.24％，料水比在5/3，pH7.5時(shí)產(chǎn)蛋白酶可達(dá)4572U/g、纖維

4、素酶可達(dá)1923U/g。 選擇1日齡商品代AA肉雞，研究分別在玉米-豆粕型和玉米-小麥-豆粕型日糧中添加粗酶制劑對(duì)肉雞生產(chǎn)性能、腸道菌群及免疫器官發(fā)育的影響。結(jié)果表明，添加粗酶制劑顯著降低了肉雞的料肉比(P＜0.05)，有提高肉雞1-42日齡日增重和出欄體重的趨勢(shì)(P＜0.10)；促進(jìn)了肉雞免疫器官發(fā)育提高了免疫功能，并能夠促進(jìn)肉雞腸道中乳酸桿菌的增殖，減少腸道大腸桿菌的數(shù)量，從而在一定程度上改善肉雞的腸道微生態(tài)環(huán)境；在玉米-小