褪黑素(Melatonin MT)對(duì)大鼠急性脊髓損傷內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激蛋白GADD153-CHOP表達(dá)的影響.pdf

1、目的:觀(guān)察褪黑素(melatonin,MT)對(duì)大鼠急性脊髓損傷(ASCI)后脊髓組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白GADD153/CHOP表達(dá)的影響,探討其對(duì)脊髓損傷的保護(hù)作用及機(jī)制。
　　 方法:以改良Allen’s法制作SD大鼠脊髓損傷動(dòng)物模型(使用10g金屬棒從2.5cm高度打擊大鼠T9-10)。96只SD大鼠隨機(jī)分為三大組:脊髓損傷褪黑素(MT)治療組及脊髓損傷5％乙醇處理組和生理鹽水(NS)處理組,上述每個(gè)組又按不同時(shí)間點(diǎn)3h、1

2、d、3d、7d各分四個(gè)處理組,每組8 R實(shí)驗(yàn)大鼠,共十二組；所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按分組在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)3h、1d、3d、7d處死并獲取損傷節(jié)段脊髓組織標(biāo)本,每只實(shí)驗(yàn)大鼠處死前以改良Tarlov評(píng)分法評(píng)價(jià)其神經(jīng)功能,所有脊髓組織標(biāo)本均以免疫組化法檢測(cè)CHOP表達(dá)及TUNEL方法檢測(cè)細(xì)胞凋亡來(lái)評(píng)估褪黑素組與乙醇、鹽水處理組間的差異。其量的評(píng)定借助于麥克奧迪數(shù)碼醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)A(Motic.med6.0)軟件,結(jié)果分別用IOD(integrated o

3、ptical densit),累積光密度)及細(xì)胞凋亡指數(shù)(AI)來(lái)表示。
　　 結(jié)果:MT組與乙醇處理組、NS處理組不同時(shí)間點(diǎn)處死前Tarlov評(píng)分依次分別為:3(h)小時(shí)Tarlov評(píng)分為2.82±0.12和2.68±0.21、2.71±0.17；1(d)天Tarlov評(píng)分為2.68±0.06和2.58±0.06、2.52±0.19；3(d)天Tarlov評(píng)分為2.60±0.37和2.37±0.11、2.38±0.12；7(d

4、)天Tarlov評(píng)分為3.51±0.08和2.85±0.04、2.80±0.10；MT組與乙醇處理組、NS處理組比較,除3h時(shí)間點(diǎn)外,其他各個(gè)時(shí)間點(diǎn)MT組大鼠Tarlov評(píng)分明顯高于乙醇處理組、NS處理組,且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p＜0.05),以3d時(shí)間點(diǎn)后MT組脊髓功能改善更明顯。乙醇處理組與NS處理組之間各時(shí)間點(diǎn)Tarlov評(píng)分比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。CHOP在各組大鼠脊髓組織中均呈陽(yáng)性表達(dá),MT組與乙醇處理組、NS處理組除3小時(shí)時(shí)間點(diǎn)CH

5、OP表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外,其他各時(shí)間點(diǎn)CHOP表達(dá)明顯低于乙醇、NS組,且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05),乙醇處理組與NS處理組之間各時(shí)間點(diǎn)CHOP表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MT組內(nèi),3h組和1d組、3d組、7d組各組CHOP表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05),且CHOP表達(dá)呈現(xiàn)3h＜1d＜3d＞7d之特點(diǎn)。TUNEL方法檢測(cè)細(xì)胞凋亡發(fā)現(xiàn)MT組和乙醇處理組、NS處理組3h即出現(xiàn)細(xì)胞凋亡,三組均于3d達(dá)到凋亡高峰,7d凋亡下降,三組除3h

6、時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞凋亡指數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外,其他各時(shí)間點(diǎn)MT組與乙醇處理組、NS處理組細(xì)胞凋亡差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),MT組細(xì)胞凋亡指數(shù)明顯低于乙醇處理組、NS處理組,且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05),乙醇處理組與NS處理組間細(xì)胞凋亡指數(shù)比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MT組內(nèi)各時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞凋亡差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05),且細(xì)胞凋亡指數(shù)呈現(xiàn)3h＜1d＜3d＞7d之特點(diǎn)。
　　 結(jié)論:
　　 1.本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用改良Allen’